Safraninegenskaper, användning, tekniker, toxicitet

De Safranin Det är ett meriquinoidfärgämne, uppkallat för att ha i sin kemiska struktur av 2 bensenringar och 2 kinoidringar, den senare är de som ger den röda färgen.

Det kallas också Safranine eller Basic Red Dimetyl i sin sammanfattningsform, eftersom dess vetenskapliga namn är 3,7-diamino-2,8-dimetyl-5-fenylfenylfenyll_tjugoH₁₉N₄ Kli.

Kemisk struktur av safranin som indikerar bensen- och kinoidringarna/ vattenlösningen av safranin. Källa: Neurotoger [Public Domain] Redigerad av MSC. Marielsa Gil/Lhchem [CC BY-SA 3.0 (https: // CreativeCommons.Org/licenser/BY-SA/3.0)]

Det finns en variant som heter Trimethyle-Safranine men det finns ingen signifikant skillnad mellan båda ämnena.

Safranin är ett monokromatiskt färgämne och enligt egenskaperna hos den kemiska formeln är det ett positivt laddningsämne. Därför har den affinitet med negativt laddade strukturer. Dessa strukturer kommer att färgas röda.

Den här egenskapen ger tillämpbarhet i många histologiska tekniker för att färga olika cellulära strukturer, både från eukaryota och prokaryota organismer.

Safranin används som ett kontrastfärgämne i viktiga och välkända rutinanvändningstekniker i bakteriologi. Dessa tekniker är: Gram-Huckers färgning, Schaeffer Fulton-färgning för sporer eller bakteriekapslar färgning, bland andra.

[TOC]

Egenskaper

Färgen på saffran (krydda erhållen från stigmas i blomman Crocus Sative) var inspiration att placera namnet på detta färgämne. Från termen saffran kommer namnet på Safranine. Det beror på den stora likheten mellan färgen på saffran och den färg som detta färgämne ger.

Safranin uppnås som kristaller eller pulver, båda presentationerna är lösliga i vatten. Safranine Dye har ingen lukt. Fläckröda strukturer. Strukturer som lockar till Safranine Dye kallas safranofiler.

Strukturellt sett är safraninen komplex, den har två bensenring i ändarna och i mitten finns de två kinoidringarna där katjon n ligger⁺. Strukturens centrum är det system som ansvarar för att tillhandahålla färg. Genom denna egenskap klassificeras detta färgämne inom kategori II.

Använda sig av

Safranine används för att färga olika strukturer. Speciellt höjdpunkter Kulchitskys celler som finns i gastrointestinala kanaler, även kallade enterocromofinesceller.

Det kan färga mikroorganismer som tillhör familjen Rickettsiaceae. På samma sätt används den i olika tekniker, såsom Koster's Method, en modifierad för färgning av könsbakterier Brucella.

Å andra sidan används Safranine i färgningstekniken för Schaeffer Fulton-sporer och i Gram-Huckers färgning. I båda teknikerna fungerar Safranine som ett kontrastfärgämne.

Kan tjäna dig: indian

I den första har sporerna färgen på den gröna av malakit och resten av strukturerna är röda av Safranine. I det andra förlorar Gram -negativa bakterier färgen på det violetta glaset i missfärgningssteget, därför är Safranin den som fläckar de gram negativa bakterierna i rött.

Dessutom används Safranin i bakteriologi för att förbereda Brucella -agar med en 1: 5000 Safraninutspädning. Detta medium tjänar till att skilja arten Brucella suis av resten av arten. Brucella melitensis och Brucella abortus Väx i detta medium men B. suis Det hämmas.

Inom det agroindustriella fältet har Safranin använts till 2,25% och utspäddes 1:10 för att färga stamprover från sockerrörsanläggningen.

Denna växt påverkas ofta av bakterier Leifsonia xyli Underlag. Xyli, som skadar växtens Xilema. Färgade stjälkar utvärderas för att bestämma xylemkärlen.

Tekniker inom området bakteriologi

Castañeda -färgning för R -färgIckettsias

En blod- eller vävnadsstryk placeras i en buffertlösning (fosfatdämpning av pH 7,6). Det är tillåtet att torka spontant och täckas sedan med metylenblått i 3 minuter och sammandras med Safranine. Rickettsias färgade blå, kontrasterande med den röda bakgrunden.

Modifierad kosterfärgning för Brucella

En utstryk utförs och flamea i tändaren för fixering. Därefter är den täckt med en blandning av 2 delar mättad vattenhaltig safranin med 3 delar KOH 1 mol/L -lösning, i 1 minut. En tvätt med destillerat vatten utförs och 1% fenado metylenblått.

Om provet innehåller könsbakterier Brucella Dessa kommer att observeras orange i en blå bakgrund.

Bakteriekapslar

En blandning av bakteriell suspension med kinesisk bläck utförs och Safranin tillsätts. En rödaktig halo kommer att observeras vid mikroskopet runt varje bakteriekapsel med en svart bakgrund.

Kan tjäna dig: rena ämnen

Sporers färgning Schaeffer Fulton

En utvidgad med bakteriesuspensionen utförs. Då är den fixerad att värmen. Den är täckt med 5%malakitgrön, ofta flameting tills utsläpp av ångor. Processen upprepas i 6-10 minuter. Slutligen tvättas den med vatten och hyrs med 0,5% Safranin i 30 sekunder. Bacillerna är färgade röda och de gröna sporerna.

Gram-hucker färgning

En utvidgad med bakteriesuspension utförs och fixeras till värme. Lamina med violett glas med 1 minut täcks. Sedan placeras Lugol som en mordant lösning per 1 minut. Därefter missfärgas det med acetonalkohol och anställs slutligen med Safranin i 30 sekunder.

Gram positiva bakterier är färgade blå violetta och gram negativa bakterier av rött.

Vissa laboratorier har slutat använda Gram-Hucker-tekniken för att anta den modifierade Gram-Kopeloff-tekniken. I det senare ersätts Safranin av grundläggande fuchsin. Detta beror på att Safranin svagt fläckar arter av släkten Legionella, Campylobacter och Brucella.

Tekniker inom histologinområdet

Kulchitsky cellfärgning (enterocromofines)

Vävnadsnedskärningarna i gastrointestinala kanaler med silverklorid färgas. Sedan missfärgas den med natriumtiosulfat och anställs slutligen med Safranine.

Kulchitsky -celler kännetecknas för att de presenteras med svartbruna granuler.

Färgning för artrosdetektering

Safranin eftersom den har en positiv belastning, karboxi och sulfatgrupper av glykosaminoglykaner binder mycket bra. Dessa är en del av proteoglykaner som utgör ledbrosk. I detta avseende, när du färgar med Safranin eller kan identifieras om det finns en förlust av brosk eller inte.

Förlust av broskvävnad kan mätas genom Mankin -skalan eller kallas också artrosskala.

Tekniken förklaras sedan: det histologiska snittet är nedsänkt i ett bricka med Weigerts järnhematoxylinlösning, sedan passeras den genom sur alkohol och tvättas med vatten.

Fortsätt färgprocessen genom att fördjupa arket i snabbgrönt, tvättar med ättiksyra och nu sänks i Safranin eller. För att avsluta processen är den dehydratiserad med hjälp av alkoholer i olika koncentrationer i stigande ordning. Det sista steget kräver Xileno eller Xilol för provet för att klargöra.

Kan tjäna dig: metalloider

Lakorna är konditionerade med Kanada balsam eller liknar att observeras vid ett mikroskop. 

Med denna teknik är kärnorna färgade svarta, det gröna benet och brosken där de röda proteoglykanerna finns.

Tincion för identifiering av makroalgas

Pérez et al föreslog 2003 en enkel och ekonomisk teknik för att färga makroalgorna. Prover framställs i histologiska snitt med paraffin. Nedskärningarna är inställda med 1% glycerin, så låter sig vara helt torrt. Sedan placeras den i xylol för att eliminera paraffin.

Snittet rehydratiseras, vilket gör att det passerar genom en serie brickor som innehåller etanol i olika grader av koncentration (fallande ordning), i 2 minuter i varje.

Därefter färgas den i 5 minuter med en 3: 1 -blandning av 1% safranin med 1% toluidinblått, båda beredda med 50% etanol. Blandningen tillsätts tre droppar picrinsyra som fungerar som en mordant.

Då blir den uttorkad igen genom alkoholbrickorna, men den här gången stiger upp. Slutligen klargörs det med Xilol och provet framställs med Kanada balsam som ska observeras.

Giftighet

Lyckligtvis är Safranine ett färgämne som inte representerar en fara för dem som manipulerar det. Det är ett oskyldigt färgämne, det är inte cancerframkallande och är inte brandfarligt heller.

I direktkontakt med huden eller slemhinnan kan det orsaka en liten rodnad i området, utan större komplikationer. För detta rekommenderas att tvätta det drabbade området med mycket vatten.

Referenser

1. Garcia h. Safranine Dye eller. Hälsoteknik, 2012; 1 (2): 83-85. Finns på: Medigrafisk.com
2. Gil m. Gramfärgning: Foundation, material, teknik och användningar. 2019. Finns på: Lofede.com
3. Gil m. Färgning av sporer: Foundation, tekniker och användningsområden. 2019. Finns på: Lofede.com
4. Safranin." Wikipedia, fri encyklopedi. 7 mar 2017, 10:39 UTC. Sedan 2019 är 20:49.Wikipedia.org
5. Pérez-Cortéz S, Vera B, Sánchez C. Användbar färgteknik i den anatomiska tolkningen av Graciliasis tenuifrons och Gracilaria chilensis (Rhodophyta). Botlag. Venez. 2003; 26 (2): 237-244. Finns på: Scielo.org.
6. Aleika Church, Peralta Esther Lilia, Alvarez Elba, Milián J, Matos Madyu. Förhållandet mellan xylemkärlen och närvaron av Leifsonia Xyli Subp. Xyli. Varv. Grönskydd. 2007; 22 (1): 65-65. Finns på: Scielo.Sld