Czapek huvud, förberedelser, användningar och begränsningar

han Czapek agar (CZA) är ett selektivt fast odlingsmedium speciellt utformat för odling av bakterier och saprofyter svampar. Det skapades av botanikern Friedrich Johann Franz Czapek, av polskt ursprung, och den amerikanska kemisten Arthur Wayland Dox; Det är därför denna agar också kallas czapek-dox halva.

Det ursprungliga mediet var flytande, men senare tillkom senare för att göra ett fast medium. Czapek -mediet består av natriumnitrat, bipotasiskt fosfat, magnesiumsulfat, kaliumklorid, järnhaltig sulfat, sackaros, agar och destillerat vatten.

Czapek a. Aspergillus parasiticus b. Aspergillus fumigatus källa: a. Medmyco [CC BY-SA 4.0 (https: // CreativeCommons.Org/licenser/BY-SA/4.0)]/ b. Foto: Dr. David Midgley. Wikipedia.com

Czapek -agaren är 7.3, men det finns en variant till vilken 10% mjölksyra tillsätts vars pH är 3,5. Detta sura medium används för odling av acidofila mikroorganismer.

Å andra sidan modifierade vissa kommersiella hus sammansättningen av Czapek -agaren genom att förändra magnesiumsulfat och bipotasiskt fosfat med glyceofosfat; Denna modifiering förhindrar utfällningen av magnesiumfosfat som observerats med den konventionella formeln. På samma sätt finns det en annan variant som jästextrakt läggs till.

Slutligen rekommenderas Czapek Agar av American Public Health Association APHA för studien av Actinomycets SP, Aspergillus SP, Paecilomyces SP och Penicillium sp. Dessa arter kännetecknas av att vara miljömikroorganismer och opportunistiska patogener.

[TOC]

Grund

Detta medium innehåller sackaros; Detta kolhydrat fungerar som en kolkälla, medan natriumnitrat är källan till kväve, men till skillnad från andra medel är kväve som tillhandahålls är oorganisk typ.

Av denna anledning anses Czapek -mediet vara selektivt, eftersom det bara kan utveckla mikroorganismer som kan använda oorganiska föreningar som den enda kvävekällan.

Som ett reglerande substans i den medelstora osmolariteten är det bipotasiska fosfatet. Å andra sidan ger magnesiumsulfat, kaliumklorid och järnsulfat viktiga mineraler för tillväxt av saprofyter mikroorganismer (fritt liv). Med denna formel bildas en fällning av magnesiumfosfat.

Det kan tjäna dig: Agar Standard Account: Foundation, Preparation and Uses

Slutligen är agar-adding den förening som ger den fasta konsistensen för miljön och vattnet är lösningsmedlet för alla komponenter.

Med den modifierade CZAPEK -agarformeln finns det ingen utfällning och förbättrar tillväxten i tillväxten av vissa svampar.

Den extrema surheten i den czapek acidiska agar gör detta till ett mer selektivt medel, vilket endast tillåter tillväxten av acidofila mikroorganismer, som kan använda oorganiskt kväve. Medan Czapek-Levadura Agar förbättrar prestandan för vissa svampar.

Förberedelse

Halv czapek-dox

Väg 49 gr dehydratiserad kultur och upplöses i destillerat vatten. Applicera värme på koka. Skaka blandningen ofta tills den är helt upplöst.

-Czapek agar

Distribuera blandningen löst i rör och autoklavat vid 121 ° C i 15 minuter. När du tar bort från autoklaven, homogenisera före sänggåendet och låt stelna.

-Czapek agar plattor

Autoklavera blandningen upplöst vid 121 ° C i 15 minuter och när man låter svalna vid 50 ° C, homogenisera och hälla 20 ml i steril petri. Låt stelna, investera och spara i kylen tills det används.

PH måste vara 7,3 ± 0,2. Färgen på det dehydratiserade mediet är vit och beredd är lätt bärnsten, något molnigt på grund av närvaron av en flockningsmedel fällning.

Halv czapek en pH -syra

Förbered såsom beskrivits, men tillsätt 10 ml steril steril syra till 10% för varje liter med beredd medium. Det modifierade CZAPEK -mediet måste vara vid pH 3,5 ± 0,2.

Hälften modifierad czapek

Väg 45,4 gr av det dehydratiserade mediet och lösas upp i 1 liter vatten. Resten av förberedelserna är lika med den som beskrivs ovan. Färgen på det dehydratiserade mediet är vit och beredd är vitaktig färg. Det slutliga pH för mediet är 6,8 ± 0,2.

Det kan tjäna dig: vimentin: egenskaper, struktur, funktioner och användningar

Halv czapek-levadura

Kallas också Czapek-Extrahera av jäst (CYA). Innehåller elementen i den klassiska Czapek -agaren plus jästextrakt.

Använda sig av

CZAPEK -mediet används för att leta efter saprofyter mikroorganismer i jordprover, grönsaker, korn, luft, insekter, bland andra.

Czapek En sur agar används för tillväxt av acidofila mikroorganismer, medan modifierad czapek -agar är särskilt användbar för bildandet av klamidosporer i komplexa arter Candida albicans.

Slutligen är Czapek -Levadura Agar mycket användbar för isolering av Aspergillus och Penicillium.

Såtas

-Czapek agar

För att söka aktinomyceter på marken, fortsätt enligt följande: Provet med vatten fenoliserat med 30 minuter behandlas och sedan planteras 1 ml av suspensionen i Czapek -agaren. Inkuberas vid 28 ° C i 5 till 7 dagar.

För grönsaks-, spannmåls- och insektsprover placeras de direkt på agaren. Utspädningar kan också göras och så 0,1 ml på agarens yta.

-Modifierad czapek -agar

För sådd som en rak hand eller nål används, genomsyras den med vattnet och inokulerar skopan som gör en punktering tills den berör plåtens bas. Inkubera i 24 timmar vid 28 ° C och undersöka med ett mikroskop över och under plattan för att observera om klamidosporerna har bildats.

Inkubationstemperatur och tid

Temperaturen och inkubationstiden varierar beroende på vilken typ av mikroorganism som söks isolera. Vanligtvis inkuberas plattorna med en till två veckor i ett temperaturintervall från 20 till 25 ° C.

Det finns dock specifika förhållanden för vissa stammar. Till exempel har de flesta arter av släktet Aspergillus optimal tillväxt vid 30 ° C; dock TILL. fumigatus växa vid 50 ° C.

När det gäller inkubationstiden är en eller två veckor dock normal Candida albicans Det kan utvecklas inom 24 till 48 timmar vid 25 ° C.

Kan tjäna dig: lipogenes: egenskaper, funktioner och reaktioner

Egenskaper hos vissa kolonier i detta medium

-Penicillium atravenetum

Det sker i 12 dagars inkubation vid 27 ° C. Dess kolonier är små (25 mm).

Kolonierna ser velistande ut, med en vit definierad kant och i mitten presenterar den en grönaktig blå ton som är överens om att bli grå. Omvänt av kolonin är orange och placerar i mitten av samma färg genom pigmentproduktion.

-Aspergillus niger

Det utvecklas med ett vitt till gult mycelium och svarta sporer.

-Candida albicans

Krämig beige lätta kolonier utvecklas tydliga. I den modifierade CZAPEK -agarformuläret.

-Aspergillus parasiticus

Ett mörkgrönt mycelium utvecklas på 7 dagar vid 25 ° C.

QA

För att utvärdera kvaliteten på odlingsmediet kan certifierade kontrollstammar såas, till exempel: Aspergillus niger MKTA 16404, Candida albicans MKTA 10231.

Aspergillus niger utvecklar ett vitt till gult mycelium och svarta sporer på cirka 5 dagar, medan Candida albicans Det kommer att ha tillfredsställande tillväxt inom 24 timmars inkubation vid 25 ° C; Kolonierna är krämfärg.

Begränsningar

Vissa studier har avslöjat att för återhämtning av Actinomycetes är agaren med bästa prestanda påven dextrosagar, vilket lämnar Czapek -agaren på andra plats, men för återhämtning av Aspergillus och penicillium är Czapek agar den som ger den största återhämtningen Betygsätta.

Referenser

1. Dávila M, et al. Antagonistiska aktinomyceter mot fytopatogena svampar av jordbruks betydelse. Varv. Mex. vetenskap. Lantbruk 2013, 4 (8): 1187-1196. Finns på: Scielo.org.
2. Luna M, Lozada och, vete. Isolering av stammar av Aspergillus niger, Ocratoxin A Producers, i Café Verde (Arabica Coffea) lagrad. Varv. Mex. Mikrofon . 2010; 32: 63-68. Tillgänglig i.Scielo.org.
3. Wikipedia -bidragsgivare. Czapek medum. Wikipedia, den fria encyklopedin. 13 januari 2019, 20:30 UTC. Finns på: in.Wikipedia.org
4. Condra pronadisa laboratorier. Modifierad czapek-dox-agar. Finns på: Condalab.com
5. Microkit -odlingsmedia. Czapek-dox-agar. GODPONIBLE IN: Media Cultutive.com