Hektoen Foundation, förberedelser och användningar

han Haktoen agar O Agar Hektoen enteric är ett solidt, selektivt och differentiellt kulturmedium. Det skapades vid Hektoen Institute av King och Metzger för isolering av enteropatogena bakterier i Shigella- och Salmonella -genrerna.

Mediet består av peptonprotein, jästextrakt, gallsalter, laktos, sackaros, salicin, natriumtiosulfat, natriumklorid, järncitrat, ammoniumcitrat, bromoolblått, syrafuchsin och agar och agar och agar. Denna formulering gör det möjligt att skilja Shigella- och Salmonella -genrerna från resten av bakterierna som kan växa i detta medium.

TILL. Hektoen Virgen B ague b. Haktoen Agars. Källa: Flickr.com/den ursprungliga uppladdaren var Philippinjl på French Wikipedia. [CC BY-SA 2.0 fr (https: // creativecommons.Org/licenser/BY-SA/2.0/fr/gärning.i)]

Även om det finns andra medier med samma funktion som Hektoen Agar, har detta en större fördel jämfört med andra medier, särskilt när de vill återhämta arter av Shigella.

Arter av båda släkten ger allvarliga gastrointestinala problem hos människan på grund av konsumtion av förorenade livsmedel; Därför är överföringen fekal - muntlig. Det är därför användningen av Hektoen Agar främst indikeras i den mikrobiologiska analysen av avföring och livsmedelsprover.

[TOC]

Grund

Hektoen Agar innehåller peptoner och jästextrakt som en källa till näringsämnen, vilket ger de väsentliga elementen för mikrobiell utveckling.

Det har emellertid också gallsalter som verkar som hämmar tillväxten av vissa bakterier, särskilt Gram -positiva och vissa gram negativa. Det är av denna anledning som det betraktas som ett selektivt medium.

Å andra sidan är Hektoen Agar ett differentiellt medium. Denna egenskap tilldelas av närvaron av jäsbara kolhydrater såsom laktos, ritning och salicyin, bredvid pH -indikatorsystemet, representerat av Bromotimol Blue och Acid Fuchsin.

Kan tjäna dig: sismonetia

Alla bakterier som kan växa i detta medium som inte tillhör släktet Salmonella och Shigella kommer att utveckla lax- eller orange kolonier förutom släktet Proteus. Detta beror på jäsningen av en eller flera av de närvarande kolhydraterna, vilket försurar mediet, vilket gör att pH -indikatorn svänger.

Å andra sidan kan släktet Shigella och Salmonella inte jäsa någon av de kolhydrater som är närvarande, med bara peptoner som en energikälla, vilket alkaliserar mediet och därför är deras kolonier grönblå.

Även i detta medium kan bakterier som kan bilda vätesulfid (färglös gas) särskiljas i detta medium. Natriumtiosulfat fungerar som en sulfidkälla medan järncitrat är det avslöjande medlet. Båda föreningarna möjliggör bildning av en svart fällning av järnsulfid som visar reaktionen.

Den svarta fällningen i mitten av kolonin med en transparent halo runt ger ett utseende av fiskögon. Denna funktion antyder närvaron av Salmonella -genren.

Slutligen upprätthåller natriumklorid den osmotiska balansen och agaren ger en solid konsistens för miljön.

Förberedelse

Väg 76 gr dehydratiserat medium och lösas upp i en liter destillerat vatten. Se upp blandningen och lämna sedan i vila i 10 till 15 minuter. Det kan värmas upp och koka, vilket ger roterande rörelser tills dess totala upplösning. Detta medium är inte steriliserat i autoklav.

När mediet når en ungefärlig temperatur på 45 ° C hälls en volym av 20 ml i petrisk sterila plattor direkt.

Kan tjäna dig: befolkningsdynamik

Agaren stelnar. Vid den tiden är de redan redo för användning. Det är tillrådligt att använda dem omedelbart. Om inte möjligt hålls de i kylen tills deras användning.

Plattorna måste tas bort i förväg från kylen innan de sådd dem för att ta omgivningstemperatur.

Medium pH måste vara 7,5 ± 0,2. Färgen på det dehydratiserade mediet är lila och beredd färg är brungrön.

Använda sig av

Användningen av Hektoen -agar rekommenderas för att söka efter bakterier av släktet Shigella och Salmonella i mat- och matprover.

Möjligheten att isolera dessa bakterier ökas avsevärt om provet i speciella buljonger tidigare är berikat.

Inokulum måste vara stark och planteringen görs genom stression. Plattorna inkuberas vid 37 ° C under 24 till 48 timmar i aerobios.

Inkubation i 48 timmar rekommenderas eftersom koloniernas egenskaper är tydligare för tolkning och differentiering vid denna tidpunkt.

QA

För att utföra kvalitetskontroll till detta medium används certifierade bakteriestammar, till exempel: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Shigella flexneri ATCC 12022 och Shigella Sonnei ATCC 25931.

De förväntade resultaten är följande: Salmonella typhimurium och  Salmonella enteritidis De måste utveckla gröna bluska kolonier med eller utan svart centrum. Medan Shigella -arter kommer att växa som gröna - blåaktig kolonier.

Du kan också inkludera stammar av Escherichia coli ATCC 29212, Proteus Mirabilis, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Enterococcus faecalis ATCC 29212 och Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Kan tjäna dig: lactosado buljong

I dessa fall är de observerade egenskaperna följande: OCH. coli och K. lunginflammation De kommer att utvecklas i denna medelstora kolonier färgla lax till orange, med en fällning av samma färg runt. Medan Proteus kommer att utveckla blågröna kolonier med eller utan svart centrum.

Medan S. aureus och  OCH. Fekalis De måste hämmas ibland OCH. Fekalis lyckas växa som gula, mycket små kolonier.

Å andra sidan, eftersom detta medium inte steriliseras i autoklav är det viktigt att utvärdera mediets sterilitet. Därför måste de från varje förberedd parti inkuberas från en till två plattor utan att ympa 37 ° C under 24 timmar i aerobios.

Uppenbarligen förväntas ingen tillväxt på plattan.

Begränsningar

-Proteus -arter kan utvecklas i detta medium och egenskaperna hos deras kolonier kan förväxlas med Salmonella eller Shigella -arter. Av denna anledning måste varje misstänkt koloni bekräftas med biokemiska tester.

-Det är nödvändigt att följa användningen av detta medium med andra mindre selektiva åldrar, för om den sökte mikroorganismen är i låga koncentrationer kunde det inte utvecklas i detta medium.

-Överhettas inte under förberedelserna, eftersom överdriven värme förändrar miljöens sammansättning.

-Ovanligt kolonier av laktosfermenterande salmonella kan visas som kan bli obemärkt.

Referenser

1. Wikipedia -bidragsgivare. Hektoen entesic agar. Wikipedia, den fria encyklopedin. 13 mars 2019, 23:38 UTC. TILLGÄNGLIG PÅ: .Wikipedia.Org/ åtkom den 16 mars 2019.
2. BD Laboratories. BD Hektoen Enteric Gang (han gank). 2013. Finns på: BD.com
3. Britania Laboratories. Hektoen entérico agar. 2015. Finns på: Britanialab.com
4. Diffco Laboratories Francisco Soria Melguizo. Haktoen agar. Finns på: f-soria.är
5. Difco & BBL Manual, Hektoen Enteric Agar. 2: a upplagan. Finns i: BD.com/europa