Peptonada Foundation, förberedelser och användningar

han peptonada vatten Det är ett sätt att vätska anrikning, inte selektiv, främst används som ett utspädningsmedel för matprover eller annat material. Detta innebär att den kemiska synvinkeln är mycket enkel, den innehåller pepton av kött, natriumklorid och vatten.

Det har något näringsvärde, vilket tillåter berikning av provet. Om det finns misshandlade bakterier har detta medium kraften att reparera livskraften. Det är särskilt användbart vid återhämtning av bakterier som tillhör familjen Enterobacteriaceae.

Peptonada vatten i burkar. Källa: MSc. Marielsa Gil

När det gäller återhämtning av Salmonellas rekommenderas användningen av den buffrade Peptonada -vattenvarianten; Detta fungerar som ett sätt att förankra provet, i detta fall innehåller det andra element såsom dysótisk fosfat och dipotassiumfosfat.

Normalt förbereder Peptonada vatten neutralt pH, men det finns andra varianter där pH är nödvändigt för att vara 8,5 ± 0,2 (alkaliskt), eftersom bakterierna som är avsedda att isolera är alkalofil Vibrio kolera.

Å andra sidan kan detta medium användas som basmedium för kolhydratfermenteringstester.

[TOC]

Grund

Peptonas tillhandahåller de näringsämnen som krävs för bakteriell utveckling, särskilt kväve- och kortkedjaminosyror, medan natriumklorid upprätthåller den osmotiska balansen.

Dessutom tillåter mediet att sprida, homogenisera och reparera bakterieceller som har skadats av underkastelse till industriella processer.

Eftersom utspädningsmedel är idealiskt, effektivt ersätter den fysiologiska lösningen (SSF) eller fosfatdämpningslösningen (PBS).

Bakterietillväxt blir tydlig av observationen av grumligheten hos samma.

Förberedelse

Hemlagad (icke -kommersiell) förberedelse

Väg 1 gr pepton och 8,5 gr natriumklorid, lös i 1 liter destillerat vatten. PH måste justeras till 7.0. För detta kan du använda natriumklorid 1 n.

Kan tjäna dig: övergående grödor

Förberedelse med kommersiellt medium

Väg 15 gr dehydratiserat medium och lösas upp i en liter destillerat vatten. Homogenisera blandningen. Vid behov kokas blandningen i 1 minut för att hjälpa den totala lösningen. Servera i 100 ml burkar eller 10 ml rör vid behov. Autoklavar vid 121 ° C i 15 minuter.

Cool och användning i kylskåp. Det sista pH för mediet är 7,2 ± 0,2.

Färgen på det dehydratiserade mediet är lätt och beredd beige är klar bärnsten.

Förberedelse för jäsningstester

Till föregående beredning - efter sterilisering bör kolhydrat läggas till en slutlig 1%-koncentration, plus Andrade -indikatorn (syra fuchsin) eller röd fenol (0.018 g/l). Rören ska placeras en Durham -klocka för observation av gasbildning.

Andra Peptonada -vattenvarianter

-Buffrat peptonada vatten

Detta innehåller enzymatisk kaseinhydrolyserad, natriumklorid, dihydrogen fosfat av kalium och väte -natriumdodekahydrat natriumfosfat. Det slutliga pH är 7,0 ± 0,2.

För att förbereda, väga 20 gr av det dehydratiserade mediet och lösa upp i 1 liter destillerat vatten. Lämna i cirka 5 minuter. Värme med 1 minut tills den är helt upplöst.

Häll över tillräckliga burkar efter behovet. Sterilisera med autoklaven vid 121 ° C i 15 minuter.

-Alkalisk peptonada vatten

Väg 25 gr av det dehydratiserade mediet och upplöses i 1 liter vatten. Fortsätt som beskrivits ovan. PH -värdet varierar från 8.3 till 8.7.

Använda sig av

Inokulum görs genom att placera provet direkt.

Det används för att utspäda proverna, särskilt när det misstänks att det kan skadas bakterier. I allmänhet är utspädningar 1:10 och 1: 100.

Kan tjäna dig: Varför producerar inte svampar sin egen mat?

Den inkuberas i 24 timmar i aerobios vid 35-37 ° C.

Avföringsprover

För avföringsprover på jakt efter Salmonella rekommenderas användningen av buffrat eller buffrat vatten som ett sätt att förinställa förinställningen.

För att göra detta, fortsätt på följande sätt:

Om avföring bildas för att ta 1 gr provet. Om de är flytande, ta 1 ml avföring och upphäng i ett rör med 10 ml buffrat peptonada vatten. När det gäller rektala vattpinnar, ladda ner materialet som finns i vattnet i röret med Peptonada buffrat vatten.

I alla fall blanda och homogenisera provet mycket bra.

Inkubera vid 37 ° C i 18 till 24 timmar. Därefter subkulturell i en anrikningsbuljong som en selenito-buljong cystin eller tetrationell buljong vid 37 ° C under 18-24 timmar mer. Slutligen växa i selektiva medier för Salmonella, såsom Agar SS, Agar XLD, Hektoen Agar, bland andra.

Matprover

Peptonada-vatten används som ett sätt att anrikas eller som ett enkelt utspädningsmedel, men om arter av Salmonella söks används det som ett sätt att förinställa, som redan beskrivits.

I mat, fortsätt på följande sätt:

För fasta livsmedel ångrar 25 gr av provet och för flytande livsmedel, mät 25 ml av samma. Placera denna del i burkar som innehåller 225 ml Peptonada -vatten. Blanda och homogenisera provet.

Om man misstänker att den mikrobiella belastningen är hög, kan serie- eller decimalutspädningar genomföras för att underlätta räkningen av kolonierna som bildar enheter (UFC).

Antalet utspädningar beror på typen av prov och den analytiska upplevelsen.

Om det tvärtom misstänks att den mikrobiella belastningen är mycket låg, är det inte nödvändigt att utföra utspädningar. Därefter subjektivt i selektiva medier.

Kan tjäna dig: katalas: egenskaper, struktur, funktioner, patologier

När det gäller mat från havet, som skaldjur, fisk, bland andra, på jakt efter Vibrio kolera eller andra arter av Vibrio, Peptonada -vatten justerat till pH 8,5 (alkaliskt Peptonada -vatten) bör användas (alkalisk peptonada).

QA

Från varje förberedd parti måste man inkubera två rör utan att ympa i 24 timmar i aerobios vid 37 ° C. Tiden är över, turbiditet eller färgförändring bör inte observeras.

Kända kontroller kan också användas för att utvärdera dess effektivitet:

För detta kan du använda följande bakteriestammar: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8927, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 1428, Salmonella enteritidis ATCC 13076.

I alla fall förväntas en tillfredsställande mikrobiell utveckling, vilket observeras av miljöns turbiditet.

Begränsningar

-Det dehydratiserade mediet är mycket hygroskopiskt, så det måste hållas borta från fukt.

-Mediet ska inte användas om någon typ av försämring observeras.

-Det dehydratiserade odlingsmediet bör hållas mellan 10 - 35 ° C

-Det beredda mediet måste hållas kylda (2-8 ° C).

Referenser

1. Camacho A, Giles M, Ortegon A, Palao M, Serrano B och Velázquez eller. Tekniker för mikrobiologisk analys av livsmedel. 2009, 2: a upplagan. Kemi fakultet, UNAM. Mexiko. Version för manual och dokumentadministratör (AMYD) vid fakulteten för kemi, UNAM 1. Finns på: http: // depa.Fquim.Unk.mx
2. Britania Laboratories. Buffrat peptonada vatten. 2015. Finns på: Britanialab.com
3. Neogen Laboratories. Peptonada vatten. Finns på: FoodSafety.Neogen.com
4. Britania Laboratories. Peptonada vatten. 2015. Finns på: Britanialab.com
5. Merck Laboratories. Peptonada buffrat vatten. Finns på: MerckMillipore.com
6. Condra pronadisa laboratorier. Alkalisk peptonada vatten. Finns på: Condalab.com
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 ed. Pan -amerikanska redaktionella.TILL. Argentina.