Bismut sulfitbyrå, förberedelser och användningar

han vismutsulfitagar Det är en solid, selektiv och differentiell kulturmedel, speciellt formulerad för isolering av Salmonella enterica subgrupo enterica typhi seretypo, Bland andra arter av Salmonella. Miljön är känd som BSA håller med på engelska Bismuth Sulfite Agar.

Den ursprungliga Bismuth -sulfitagarformeln skapades 1927 av Wilson och Blair (glukosbismut sulfitjärnmedium); Denna innehöll natriumsulfit, glukos, vismutlösning, ammoniumcitrat, järnhaltig sulfat och agar-adding.

48 -timmar tillväxt av Salmonella SP -inkubation i vismut sulfitagar. Källa: Pixnio.com Författare: Dr. W. R. Erving, USCDCP

Numera finns det en modifiering av det ursprungliga mediet, sammansatt av köttekstrakt, peptoner av kött och kasein, vismut sulfitindikator, glukos, dinatriumfosfat, järnhaltig sulfat, ljusgrön och agar-agar.

Det finns många sätt för isolering av Salmonella -arter, men när det gäller att återhämta Typhi -serotypen, presenterar den bismut sulfitagaren en anmärkningsvärd fördel jämfört med dem, eftersom en mycket låg eller noll återhämtning av denna mikroorganism erhålls erhålls en anmärkningsvärd fördel jämfört med dem, eftersom en mycket låg eller noll återhämtning av denna mikroorganism erhålls erhålls.

Det är emellertid nödvändigt att använda mer än en typ av medium när det gäller att isolera enteropatogen, eftersom vismut sulfitagar är mindre effektiv för andra Salmonella -arter och för Shigella -släktet, som hämmas eller utvecklas mycket dåligt i denna agar.

Det bör noteras att Typhi -serotypen är en av de viktigaste enteropatogenerna i människan, detta är dess enda reservoar, detta är dess enda reservoar, detta är dess enda reservoar. Denna serovariety producerar tyfusfeber, gastroenterit, bakterie och septikemi.

Av denna anledning är det relevant att inkludera denna agar när prover av vatten, avföring eller livsmedel analyseras där din närvaro misstänks.

[TOC]

Grund

Som de flesta odlingsmedier innehåller Bismuth Sulfite Agars näringsämnen för att främja bakteriell utveckling, såsom peptoner och köttekstrakt. På samma sätt fungerar glukos som en källa till energi och kol.

Kan tjäna dig: biogenetiska element

Nu kommer inte alla bakterier att växa i detta medium, eftersom vismut sulfitagar är ett selektivt medium. Detta innehåller föreningar som hämmar tillväxten av Gram -positiva mikroorganismer och vissa Gram -negativa bakterier. Dessa föreningar är: den vismut sulfitindikatorn och ljusgrön.

Å andra sidan upprätthåller DINDIUM -fosfatet osmolariteten och mediets pH.

Dessutom är vismut sulfitagar ett differentiellt medium tack vare närvaron av järnhaltig sulfat, som visar bildningen av H₂S.  H₂S bildas av bakterier reagerar med järnhaltig sulfat och bildar en tydligt synlig olöslig fällning.

Slutligen ger Agar -Aagar fast konsistens för miljön.

Förberedelse

Väg 52,3 gr av det dehydratiserade mediet och upplöses i en liter vatten. Värm för att koka blandningen i 1 minut med ofta omrörning, tills dess totala upplösning. Överhettas inte för mycket. Detta medium är inte steriliserat i autoklav, eftersom den extrema värmen skadar odlingsmediet.

Låt svalna vid 45 ° C och skaka innan du serverar på Petri sterila plattor. Det rekommenderas att göra plattor med god tjocklek. För detta måste 25 ml hällas i varje platta. Låt stelna. Som ett medel som inte steriliseras är det normalt att dess omedelbara användning föreslås.

En studie av D'Aust 1977 visade emellertid att det finns en bättre återhämtning av Salmonella typhimurium och Salmonella enteritidis Eftersom Bismuth Sulfite Medium åldras påverkas inte prestandan för serovarier Typhi och Parathyfi b.

D'Aous rekommenderar att du använder plattorna till kylningsdagen, även om den varnar för att när mediet åldras minskar selektiviteten och utvecklas lättare stammar av Proteus Vulgaris.

Det är därför, för mycket förorenade prover, såsom avföring, är det att föredra att använda det nyligen förberedda mediet. Annars använd till dag 4 av sin förberedelse. Andra författare rekommenderar att du använder plattorna dagen efter beredningen, lagrad i kylning.

Kan tjäna dig: uracil: struktur, funktioner, egenskaper, syntes

Kylda plattor bör vara humör innan du använder. Medium pH måste vara 7,5 ± 0,2. Färgen på det obetalda mediet är beige och beredd är opalescente gröngrå.

Ansökningar

Bland de prover som kan sås i detta medium är avföringsprover, konsumtionsvatten eller mat och mat.

För att förbättra isolaten rekommenderas det att utföra en pre-anrichment-behandling med laktosbuljong och efter anrikning med tetrationell buljong eller selenito buljong cystin, före sådd i bismut sulfit agarar.

Plattorna inkuberas vid 35 ° C ± 0,2 under 24 till 48 timmar, i aerobios.

Egenskaper hos kolonierna i vismut sulfitagar

Kolonierna av Salmonella Typhi De ses vanligtvis i denna agar på 24 timmar med ett svart centrum och omgiven av en ljusgrön halo. Medan Black på 48 timmar vänder sig helt på grund av vätesulfidbildning.

Salmonella parathyphi a presenterar kolonier med variabla egenskaper. Efter 18 timmars inkubation kan svarta, gröna eller transparenta kolonier observeras med mucoidutseende. Medan de vid 48 timmar observeras helt svart och ibland med en uttalad metallisk ljusstyrka.

S. Parathyfi a Det tenderar att slänga mediet runt kolonin.

Salmonella SP Svarta eller gråercolonier, med eller utan metallljust, maying blir ytan eller inte.

Coliformstammar är vanligtvis helt hämmade, men om de växer utvecklas de som ogenomskinliga gröna eller bruna kolonier och metallisk ljusstyrka. Fär inte mediet runt kolonin.

Begränsning

-Mycket svaga ympning kan orsaka kolonier av Salmonella Typhi ljusgrönt, går obemärkt och rapporterar kulturen som negativ.

Kan tjäna dig: grenar av fysiologi

- Vismut sulfitagar kan hämma återhämtningen av vissa Salmonella -arter som S. Sendai, s. Berta, s. Gallinarum, s. abort-equi.

-Detta medium hämmar de flesta arter av Shigella -släktet.

- S. Typhi och s. Arizonae De kan ge mycket liknande kolonier.

-Coliformarna producerade av h₂S som Proteus och Citrobacter producerar kolonier som liknar Salmonella, så det är nödvändigt att utföra biokemiska identifieringstester.

-En bra estria måste göras för att få isolerade kolonier; Det är det enda sättet att observera de typiska egenskaperna hos kolonierna i släktet Salmonella.

QA

För sterilitetskontroll inkuberas en plack utan att ympas vid 37 ° C, förväntas det att det inte finns någon tillväxt eller färgförändring.

För kvalitetskontroll kan du så kända stammar som:

Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella Typhi ATCC 19430, Shigella flexneri ATCC 12022, Enterococcus faecalis ATCC 29212.

Det förväntas att Escherichia coli och Shigella flexneri är delvis hämmas att utveckla grönaktiga respektive bruna bruna kolonier. Medan båda Salmonglar måste ha utmärkt utveckling med svarta kolonier med metallisk ljusstyrka och slutligen Enterococcus faecalis Måste vara helt hämmad.

Referenser

1. Wilson, W., & E. M. Mcv. Blair. Användning av ett glukosbismut sulfitjärnmedium för isolering av B. Typhosus och B. Proteus. Journal of Hygiene, 1927; 26(4), 374-391. Hämtas från .Jestor.org
2. D'Aust Jy. Effekt av lagringsförhållanden för prestandan hos vismut sulfitagar. J Clin Microbiol. 1977; 5 (2): 122-124. Finns i: NCBI.Nlm.Nih.Gov
3. IVD -laboratorier. Bismuth-sulfitagar enligt Wilson-Blair. 2009. Finns på: Bismuthsulfitagar_span_jan_2009%20 (2).Pdf
4. Himedia Laboratories. Vismutsulfitagar. 2017. Finns på: Himediabs.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 ed. Pan -amerikanska redaktionella.TILL. Argentina.
6.  Morales R, från La Cruz D, Leyva G och Ybarra M. Bakteriologisk kvalitet på rå getmjölk producerad i Miravalles, Puebla. Rev Mex från Ing Chem 2012; 11 (1): 45-54