Majsmjöl. Foundation, förberedelse och användning

han Majs mjölagar Det är ett fast odlingsmedium, låg näringskraft, användbar för den subkulturella Candida albicans. På engelska är det känt som Corn Meal Agar.

Den medelstora konventionella majsmjölet har en mycket enkel komposition, innehåller majsmjöl, agar och vatten. På grund av dess låga näringsnivå är det idealiskt att använda den vid upprätthållandet av svampstammar under måttliga tidsperioder, särskilt svarta svampar.

TILL. Grafisk representation av Candida albicans -komplexet i Cornmeal Agar. B. Clamidosporas i Candida Albicans komplexa utsikt till mikroskopet, bildat i majsmjöl. Källa: A. Grahamcolm [CC BY-SA 3.0 (https: // CreativeCommons.Org/licenser/BY-SA/3.0)]/ b. Av: cdc/dr. William Kaplan, artighet: Public Health Image Library.

Komplex sporulering Candida albicans Det gynnas i detta medium, om 1% av Tween 80 läggs till under framställningen av agaren. Clamidospores bildning är karakteristisk för denna art och praktiskt taget den enda som påverkar människan.

Det finns andra arter som bildar klamidosporer, men det är osannolikt att de påverkar människan, till exempel Candida australis, närvarande i utgången av pingviner, eller C. Clausenii, som är en saprofyt som sällan finns. Också exceptionellt arten C. Stellatoid och C. tropisk De kunde bilda dem.

Å andra sidan gynnar tillsatsen av glukos till den medelstora majsmjölet bildandet av pigment i stammar av Trikofytom rubrum.

Det är viktigt att lyfta fram att det finns svampar som inte bildar hyphaifs, inte heller pseudohifas i anfallet av majsmjöl, till exempel Cryptococcus neoformans, skilja från andra genrer.

Majsmjölagar kan förbereda sig i laboratoriet eller kommersiella medier kan också användas.

[TOC]

Grund

Majsmjöl är underlag, agar är det stelnande medlet och vatten är lösningsmedlet.

Cornmjölagar kan kompletteras med Tween 80 (Polyester 80 Sorbitita monoolat eller polysorbat). Denna förening minskar miljöns ytspänning genom sin emulgeringskraft.

Kan tjäna dig: fosfatidylinositol: struktur, träning, funktioner

Det skapar också en fientlig atmosfär som hämmar överdriven cellmultiplikation och stimulerar tillväxten av hyfer, vilket också gynnar produktionen av klamidosporer; De senare betraktade motståndsstrukturer. Denna struktur hjälper till att identifiera arten av Candida albicans.

För sin del ökar glukosen i detta medium pigmentbildningskapaciteten för vissa svampar.

Det bör noteras att den medelstora majsmjölet med glukos inte tjänar demonstrationen av klamidosporer i COmplejo Candida albicans.

Förberedelse

Hemlagad majsmjöl apar

Väg 47 gr gul majsmjöl och upplös i 500 ml destillerat vatten. Värm till 60 ºC, medan beredningen agiteras under en ungefärlig period på 1 timme. Filtrera sedan genom en bit gasväv och bomull, valfritt kan den filtreras igen genom ett Whatman -filterpapper nr 2.

Slutför volymen vid 1000 ml med destillerat vatten. Tillsätt 17 gr av agar-vatten, värme för att lösa upp. Autoklavar i 15 minuter vid 121 ° C.

Servera i sterila plattor. Spara i kylskåp.

Färgen på det beredda mediet är vitaktig med klumpigt utseende.

Om du vill förbereda majsmjöl med glukos till beredningen som beskrivs ovan för att lägga till 10 gr glukos.

Kommersiell majsmjölagar

Väg 17 gr av det dehydratiserade mediet och upplöses i 1 liter destillerat vatten. Blandningen kan värmas upp och rör sig försiktigt för att lösa upp helt. Sterilisera i autoklav vid 121 ºC, 15 lb, i 15 minuter.

Häll i petrisk sterila plattor. Låt stelna. Investera och spara i kylen tills det används. Temperament innan du använder.

PH måste vara 6,0 ± 0,2 till 25 ºC.

Majsmjölagar med Tween 80

För att följa ISO 18416 -standarden måste majsmjölagaren vara beredd på följande sätt:

Kan tjäna dig: acetylkoenzym till

Väg 65 gr per liter och tillsätt 10 ml Tween 80. Värme och koka i några minuter tills du upplöses, se till att inte överhettas för mycket. Sterilisera vid 121 ºC i 15 minuter.

Majsmjölagar med glukos

För att förbättra den kromogena kraften hos kolonier av Trichophyton Rubrum och skilja dem från T. Mentagrofyter, 0,2% glukos till den ursprungliga formeln kan läggas till. Det behöver inte ha 80, eftersom glukos hämmar bildningen av klamidosporer.

Använda sig av

Huvudsakligen är användningen av majsmjölagar avsedd för studien av Candida -stammar, vilket hjälper dess identifiering genom den karakteristiska observationen av kloidosporer i Albicans -arterna. Det vill säga användningen av denna agar fungerar som en extra metod för att identifiera dessa jäst.

I denna agar kan utveckla både saprofytiska och patogena arter, men varje form karakteristiska myceliala strukturer. Till exempel producerar arter av släktet Torulopsis inte mycelium och reproducerar endast av blastoconidia.

På samma sätt producerar Trichhosporon och Geotrichum arter artrokonidier i majsmjöl och ibland är det svårt att skilja mellan det ena och den andra.

Genotrichums artrokonidier ger en förlängning av hyféerna som liknar en hockeypinne.

Även pigmentproduktion med glukos -leveranserad majsmjölagar är användbar vid identifiering av Trikofytom rubrum.

Såtas

I agar mjöl mjöl de misstänkta kolonierna av uppriktiga. Mediet sås och inkuberas vid 22 ºC i 24 till 48 timmar. Inkubationstid kan förlängas vid behov.

Demonstration av klamidosporer

För detta ändamål måste majsmjölagaren med Tween 80 ympas med Dalmau -tekniken. Denna metod består av att ta med platinahandtaget en del av den misstänkta kolonin och göra tre parallella snitt i mitten som håller handtaget på 45º. Nedskärningarna måste separeras på ett avstånd av 1 cm mellan det ena och det andra.

Kan tjäna dig: Flora och fauna från Afrika: Representativa arter

Därefter placeras ett tidigare flamerat föremål över de sådd stretchmärken, så att den täckta hälften och den andra upptäcktes.

Inkubera plattorna planterade vid 30 ° C under 48-72 timmar och undersök sedan mikroskopet genom locken.

Underhåll av svampstammar

För underhåll av stammar planteras plack och översvämningar i kylen (4 till 8 ºC). På detta sätt kan de pågå flera veckor och användas för undervisning eller forskningsändamål.

QA

För sterilitetskontroll inkuberas en tallrik utan att ympas vid rumstemperatur, att det inte finns någon tillväxt eller färgförändring.

För kvalitetskontroll kan du så kända stammar som: Staphylococcus aureus, ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Aspergillus niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 1023, Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763.

De förväntade resultaten är partiell hämning för S. aureus och OCH. coli. Medan tillfredsställande tillväxt förväntas i resten av stammarna.

Aspergillus niger Det växer med svarta kolonier och sporuleras i en ungefärlig tid på 5 dagars inkubation.

Candida albicans Leveaduriforma kolonier med Clamidospores -produktion.

Saccharomyces cerevisiae producera stora jästceller.

Begränsningar

En gul fällning bildas längst ner på plattan som inte bör förväxlas med kolonier.

Referenser

1. Neogen Laboratories. Majs måltid. Finns på: FoodSafety.Neogen.com.
2. Microkit -odlingsmedia. Majs måltid. Finns i: Mediekultur.com.
3. Linares M, Solís F. Guide identifiering av jäst. Finns på: http: // www.guide.Jag kommer att återuppliva.
4. Urcia F, Guevara M. Varv. Peru Med.Exp. Public Health, 2002; 19 (4): 206-208. Finns på: Scielo.com
5. Hushus g. Allmän mykologi. 1994.  2: a upplagan. Central University of Venezuela, biblioteksutgåvor. Venezuela caracas.
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 ed. Pan -amerikanska redaktionella.TILL. Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. 5: e upplagan. Pan -amerikanska redaktionella.TILL. Argentina.
8. Castle e. Jämförande studie av vissa makro- och mikroskopiska metoder för isolering och erkännande av släktet Candida. Varv. Colombiansk läkemedelsvetenskap. 1970; 3 (1): 33-57. Finns i: Sciences.en i.Edu.co