EC Breatment, förberedelser och användningsområden

han Ec buljong eller buljong Escherichia coli Det är ett selektivt flytande odlingsmedium. Detta medium rekommenderas av standardmetoderna för antalet totala och fekala coliforms, med den mest troliga antalet teknik (NMP) i vatten- och livsmedelsprover, där huvudmedlet är involverat är Escherichia coli.

EC -buljongen består av triptein, laktos, gallsalter, pipotasiskt fosfat, monopotasisk fosfat, natriumklorid och vatten. Dess formel är strategiskt utformad för att gynna tillväxten av totala och fekala koliformer och förhindra utveckling av andra tillhörande mikroorganismer.

Figurativ representation av beredningen av EC -buljongen. Källa: Pixabay.com

Bakterierna Escherichia coli Det är den huvudsakliga fekala koliform som finns som ett förorenande medel i vatten- och matkällor, som är orsaken till viktiga gastrointestinala effekter.

Det bör noteras att det finns många serotyper av Escherchia coli; Bland dem kan enterohemorrágica (EHEC), enteroinvasive (EIEC), enateopathogenic (EPEC), enterotoxigena (ETEC) och enteroagregativ (EAEC) nämnas.

Detta medium har förmågan att tillåta utveckling av dem alla, men inte kan skilja dem från varandra. För detta måste ytterligare tester utföras.

Den mikrobiologiska studien av vatten och mat för det mest troliga antalet (NMP) för sökandet efter totala och fekala coliforms är ett protokoll som består av flera faser; Presumtiv fas, bekräftande fas och slutförandefas. EC -buljong används i den bekräftande fasen.

[TOC]

Grund

Ec buljong

EC -mediet är baserat på att tillhandahålla nödvändiga näringselement för optimal utveckling av totala och fekala coliforms, där bakterierna ingår Escherichia coli.

Dessa näringselement tillhandahålls av Triptein, som är en utmärkt källa till peptider och aminosyror. Dessutom innehåller den också laktos, ett jäsbart kolhydrat som ger energi och gör att du kan visa om bakterien producerar gas.

Å andra sidan innehåller mediet gallsalter som ger den selektiva naturen, eftersom det hämmar tillväxten av Gram -positiva mikroorganismer som kan finnas i provet.

Det kan tjäna dig: Flora och fauna från Nuevo León

Likaså dipotasfosfat. Detta system är nödvändigt, eftersom laktosen i buljongen tenderar att försuras mediet när det fermenteras av mikroorganismer, men detta kompenseras av fosfatsalter.

Därför är dessa element väsentliga, eftersom surhet utan kontroll kan påverka den goda utvecklingen av sökte mikroorganismer.

För sin del stabiliserar natriumklorid miljön, medan vatten är lösningsmedlet för de närvarande lösta ämnena och ger vätskekonsistensen för miljön.

EC -buljong modifierad med novobiocin

Okrend och Rose skapade en mängd EC -buljong, kallad EC -modifierad EC -buljong. Modifieringen bestod av minskningen av koncentrationen av gallsalter och aggregatet på 20 mg/dl novobiocina.

Denna modifiering gynnar återhämtningen av stammar av Escherichia coli Enterohemorrágica (O157: H7).

Denna bakterieserotyp orsakar svår hemorragisk kolit som kan orsaka hemolytiskt uremiskt syndrom (SUH); som i sin tur kan generera akut njursvikt, med en hög dödlighet som kan nå upp till 50% hos äldre.

På grund av de sjukligt orsakade av denna bakterier för konsumtion av förorenad mat rekommenderar USA: s jordbruksdepartement (USDA) att användningen av detta medium.

Förberedelse

Ec buljong

Väg 37,4 gr av det dehydratiserade mediet och lösas upp i 1 liter destillerat vatten. Blandningen måste tillåtas i 5 minuter. Därefter, i en värmekälla, slutar det att lösa vinklingen ofta.

När den är upplöst distribueras den i provrör som tidigare konditioneras med ett Durham -rör inuti. Sterilisera i autoklav vid 121 ° C i 15 minuter.

Kan tjäna dig: sfingomyeline: vad är, struktur, funktioner, syntes

Medium pH måste vara 6,9 ± 0,2.  Färgen på det dehydratiserade mediet är beige och beredd är klar bärnsten.

Buljongerna förvaras i kylen tills det används. Vid tidpunkten för användningen måste buljongerna vara vid rumstemperatur.

Å andra sidan kan EC -buljongen också framställas i dubbel koncentration.

EC -buljong modifierad med novobiocin

Väg 36,7 gr av det dehydratiserade mediet och upplöses i 1 liter vatten. Resten av förberedelserna är lika med den som beskrivs ovan.

Använda sig av

Total och fekal koliform analys

EC -buljongen är idealisk för den bekräftande fasen av coliformstudien med NMP -metoden, båda i vattenprover, som i läkemedelsprodukter och livsmedelsprodukter.

Sändare och gasproduktionsbuljonger som erhålls i den presumtiva fasen bör återställas i ljusgröna buljonger till 2% och i EC -buljong.

För totala koliformer inkuberas EC -buljonger i aerobios under 24 till 48 timmar vid 37 ° C, och för fekala koliformer inkuberas de i aerobios under 24 till 48 timmar vid 44 ° C.

I båda fallen tolkas det på följande sätt: De skumma rören med gasproduktion anses vara positiva. Om det inte finns någon gasproduktion på 24 timmar.

Positiva EC -buljonger går till den fullständiga bekräftande fasen, som består av givande i selektiva medier som MAC Conkey, EMB eller Endo Endo Agar.

Om den använda buljongen är modifierad med novobiocin rekommenderas de positiva rören för att likna i Mac Conkey Agar med Sorbitol.

QA

Kvalitetskontroll måste göras från varje beredd medium parti. För det första måste miljöns sterilitet. I detta avseende inkuberas en eller två buljonger utan inokulering i aerobios i 24 timmar vid 37 ° C. Det förväntade resultatet är en transparent buljong utan turbiditet eller färgförändring.

Kan tjäna dig: Interspecifik kompetens: Egenskaper och exempel

För det andra måste tillväxten av kända stammar utvärderas, för detta kan du använda följande bakterier: Escherichia coli, ATCC 8739, Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella typhimurium ATCC 14028.

I alla fall förväntas en tillfredsställande mikrobiell utveckling, vilket observerar en molnig buljong med gasproduktion för OCH. coli och utan gas för Salmonella.

Andra stammar som kan inkluderas i kontrollen är: Staphylococcus aureus ATCC 25923, Enterococcus faecalis ATCC 29212. Dessa stammar måste hämmas helt.

rekommendationer

-Placeringen av Durham -rören är oumbärlig för studier av coliforms.

-Distribuera mediet i provrören innan sterilisering, aldrig efter.

-Använd inte om mediet har mer än 3 månader förberett.

-Använd inte om någon förändring av de vanliga egenskaperna hos mediet observeras.

Referenser

1. Britania Laboratories. Mellersta EC. 2015. Finns på: Britanialab.com
2. OCH. coli Enterohemorragisk. Center for Food Security and Public Health. 2010. Finns på: CFSPH.ias.Edu
3. Företagsneogen. Medium EC. Finns på: FoodSafety.Neogen.com
4. Neogen. Medifierad EG modifierad med Novobiocina. Finns på: FoodSafety.Neogen.com
5. Jure M, Condorí S, Leotta G, Chinen I, Miliwebsky E, Allori C, Aulet O, av Castillo M. Upptäckt, isolering och karakterisering av Escherichia coli Shiga toxinproducent från färskt malt kött från slaktare av Concepción, provinsen Tucumán. Rev Arg of Microbiol; 2010, 42 (4): 284-287.  Finns på: www.Scielo.org.