Tioglicolate Broth Foundation, förberedelser och användningar

han Tioglykolatbuljong Det är ett berikat sätt att vätska konsistens. Det är känt med förkortningen FTM). Det skapades av Brewer och modifierades 1944 av Vera, som införlivade honom Peptone of Casein.

Detta medium har en låg oxidationspotentialreduktion, så det rekommenderas inte för utveckling av strikta aeroba bakterier, men det är idealiskt för att återhämta valfria aeroba bakterier, strikta och mikroaerofila anaeroba bakterier.

Tioglykolatbuljong utan indikator. Prov vaginal utsöndring. Källa: Bobjgalindo [CC BY-SA 4.0 (https: // CreativeCommons.Org/licenser/BY-SA/4.0)]

Den höga prestanda som observerats med detta medium i isolering och återhämtning av en mängd olika mikroorganismer, har gjort det accepterat av USA.

Dessa organisationer rekommenderar det för sterilitetskontrolltesterna för farmaceutiska produkter och för berikning av olika typer av prover.

Tioglykolat Cado består av jästextrakt, digreatisk kasein, vattenfri dextros, L-cistin, natriumklorid, natriumtioglykolat, vila och topp i en liten mängd i en liten mängd.

Det finns flera versioner av detta medium, bland dem är: tioglykolatbuljong med indikator, tioglykolatbuljong utan indikator, tioglykolatbuljong med rikande indikator med hemin och vitamin K_1, Och tioglikolatbuljong med kalkisk karbonat.

Det bör noteras att varianten av tioglykatbuljong berikad med hemin och vitamin K tjänar till att förbättra tillväxten av krävande strikta anaerober, och varianten av tioglykolatbuljong som innehåller kalciumkarbonat är användbart för att motverka syrorna som produceras under mikrobiell tillväxt.

[TOC]

Grund

Tioglykolatbuljong betraktas som en anrikning, inte selektiv eftersom den möjliggör utveckling av de flesta icke -märkande bakterier. Näringskrav tillhandahålls av jästextrakt, bukspottkörtelmältning och glukos.

Å andra sidan innehåller detta medium trots att det är en buljong en liten mängd agar; Detta orsakar en låg oxidreduktionspotential, eftersom syreinmatningsbromsar, så att syre minskar när det fördjupas inuti röret.

Det är därför detta medium är idealiskt för utvecklingen av valfria aeroba bakterier, mikroaerofiler och strikt anaerobt, dessa sista 2 utan att inkubera under dessa förhållanden. Samma medium reglerar mängden syre i miljön, som är frånvarande längst ner i röret och i tillräcklig mängd på ytan.

Kan tjäna dig: fenylalanin: egenskaper, funktioner, biosyntes, mat

På samma sätt fungerar tioglykolat och L-kistin som minskar medel, vilket bidrar till att förebygga ackumulering av ämnen som är skadliga för bakteriell utveckling, såsom peroxid. Dessutom innehåller dessa föreningar sulfidrils (-sh-) -grupper som neutraliserar de hämmande effekterna av kvicksilverderivat, arseniska, bland andra tungmetaller.

Å andra sidan är rastlöshet en oxidreduktionsindikator. Detta ämne är färglöst när det reduceras och rosa när det är oxiderat. Det finns varianterna av tioglikolatbuljong med indikator och utan indikator. Dess användning beror på typen av prov och laboratorieinställningar.

Samtidigt upprätthåller natriumklorid den osmotiska balansen i den tioglykatbuljongen och användningen av anhydra glukos förhindrar överskott av fukt i den uttorkade miljön.

Förberedelse

Tioglykolatbuljong med indikator

Väg 29,75 gr av det dehydratiserade mediet och upplöses i 1 liter destillerat vatten. Blandningen är kvar på cirka 5 minuter. Ta med en värmekälla och rör om ofta tills den löses upp helt.

Häll mediet i provrör och autoklavat vid 121 ° C i 15 minuter. Låt svalna före användning. Kontrollera insatsen för det kommersiella huset för dess bevarande. Vissa rekommenderar att du sparar vid rumstemperatur på Dark Place, och andra i kylskåp skyddat från ljus.

Det beredda mediet pH är 7,1 ± 0,2.

Färgen på det dehydratiserade mediet är lätt och beredd beige är en klar bärnsten med viss opalescens.

Tioglykolatbuljong med hemin och vitamin K -indikator₁

Det finns kommersiella medier som redan tar hemin och vitamin K₁, Special för anaerob odling.

Om du inte har ett anrikat medium för anaerober kan den grundläggande tioglykolatbuljongen framställas. För att göra detta tillsätts 10 mg heminhydroklorid och 1 mg vitamin K₁ För varje liter med medium. Men om blod eller serum tillsätts till tioglykolatbuljongen, är tillsatsen av hemin, vitamin K inte nödvändigt.

Kan tjäna dig: intra -specifik konkurrens: egenskaper, typer och exempel

Tioglykolatbuljong med kalciumkarbonat

Kommer kommersiellt och förbereder sig efter instruktionerna från insatsen.

Tioglykolatbuljong utan indikator

Detta har samma sammansättning av det grundläggande tioglykaten, men innehåller inte resazurine.

Väg 30 gr dehydratiserat medium och lösas upp i en liter destillerat vatten. Resten av beredningen är lika med den som beskrivs i tioglycate -buljongen med indikator.

Använda sig av

Tioglykolatbuljong är användbart för berikning av kliniska prover, särskilt för dem från sterila platser. Det är också användbart för icke -kliniska prover, såsom kosmetika, mediciner, etc.

För inokulering av flytande prover (såsom CSF, synovialvätska, bland andra), är proverna först centrifugering och sedan tas 2 droppar av sedimentet och placeras i tioglykolatbuljongen. Inkubera vid 35 ° C i 24 timmar. Om det för närvarande inte finns någon tillväxt (turbiditet) inkuberas den upp till högst sju dagar.

Om provet tas med HIPUS inokuleras kulturmediet först i plattor och slutligen införs vattnet i buljongen, den del som sticker ut och röret är täckt och lämnar vattpinnen inuti. Incuba vid 35 ° C i 24 timmar, maximalt 7 dagar.

För fasta prover måste den homogeniseras i fysiologisk saltlösning (SSF) och sedan ympa tioglykolatbuljongen med 2 droppar av suspensionen.

Ibland kan det användas som ett transportmedel för prover där närvaron av strikta anaerober eller som en säkerhetskopieringsbuljong misstänks.

Tioglykolatbuljongvarianten med kalciumkarbonat används för underhåll av kontroller under en längre tid, eftersom den har förmågan att neutralisera syrorna som produceras genom användning av glukos; Dessa syror är giftiga för vissa bakterier.

Tillväxten i tioglykolatbuljongen kommer att observeras på grund av miljöens grumlighet. Det rekommenderas att utföra en gramfärgning och därefter subjektivt i icke -selektiva och selektiva media, beroende på vilken typ av prov och mikroorganismer som de misstänks.

QA

För sterilitetskontroll rekommenderas det att inkubera en eller två buljonger utan att ympa. Det förväntade resultatet är en transparent buljong, utan färgförändring, även om det är normalt att en lätt rosa färg observeras på rörytan.

Det kan tjäna dig: Marine Meadow: Vad är, egenskaper, flora, fauna

För kvalitetskontroll, mellan 10 - 100 UFC av certifierade kontroller, till exempel Staphylococcus aureus ATCC 6538, Micrococcus luteus ATCC 9341, Bacillus subtilis ATCC 6633, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Clostridium sporogenes ATCC 19404, Clostridium sporogenes ATCC 11437, Vulgatusbakteroider ATCC 8482.

Inkubera vid 30-35 ° C i aerobios i 24 timmar upp till högst 3 dagar, eftersom dessa mikroorganismer är snabb tillväxt.

I alla fall förväntas god utveckling, med undantag av Micrococcus luteus och Bacillus subtilis, Där det kan finnas måttlig utveckling.

För kvalitetskontroll av tioglykolatbuljongen berikad med hemina och vitamin K₁, Kontrollstammar kan användas Vulgatusbakteroider  ATCC 8482, Clostridium perfringens ATCC 13124 och Fragilis bakteroider ATCC 25285. Det förväntade resultatet är tillfredsställande tillväxt.

rekommendationer

-Ibland kan man se att ytan på tioglykatbuljongen med indikator blir rosa; Detta beror på miljöens oxidation. Om den rosa färgen täcker 30% eller mer av den totala buljongen kan värmas upp i ett vattenbad i 5 minuter, kylas igen och används.

Detta kommer att eliminera absorberat syre och returnerar mediet till sin ursprungliga färg. Denna procedur kan bara göras en gång.

-För att förbättra tillväxten av aeroba bakterier måste den inkuberas med det något lata locket. Det är emellertid att föredra att använda för detta ändamål ett infusionsbuljong hjärnhjärta eller triptisk sojabuljong för den goda utvecklingen av strikta aerobes.

-Frysningen av miljön eller överhettning bör undvikas, eftersom båda förhållandena skadar mediet.

-Direkt ljus skadar odlingsmediet, det måste skyddas från ljus.

Referenser

1. Britania Laboratories. USP -tioglykolat med indikator. 2015. Finns på: Labbritania.com.
2. Quos SAS Laboratories. 2019. Tioglykolatbuljong. Finns på: Quios.com.co
3. BD Laboratories Fluid ThioGlyCollate Medium (FTM). 2003. Finns på: BD.com/europa
4. BBL -media framställda i rör för odling av anaeroba mikroorganismer. Tioglykatmedia. 2013. Finns på: BD.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 ed. Pan -amerikanska redaktionella.TILL. Argentina.