Sim Foundation, förberedelser och användningar

han SIM -medium Det är en halvsolid och differentiell agar, speciellt utformad för att hjälpa till att identifiera vissa bakterier, främst från Enterobacteriaceae -familjen. Det består av triptein, pepton, järnsulfat, ammoniumsulfat, natriumtiosulfat och agar.

Detta medium tillåter genomförandet av tre viktiga tester: produktion av vätesulfid (h₂S), bildandet av indol och rörlighet, därifrån kommer förkortningen Sim. På grund av dess stora användbarhet kan det inte saknas i ett bakteriologilaboratorium.

TILL. Middle Sim Commercial B. SIM H2S (-), Indol (-) och rörlighet (+) och SIM H2S (+), Indol (-), Motility (+) Testtest. Källa: A. Foto taget av författaren MSC. Marielsa Gil b. Mfloayza [CC BY-SA 3.0 (https: // CreativeCommons.Org/licenser/BY-SA/3.0)]

Till skillnad från andra medier måste detta vara halvt -fast för att upptäcka rörelsens kapacitet som vissa bakterier har. I detta avseende fungerar detta test mycket bra för enterobakterier, men inte i icke -fermentära negativa baciller, där andra metoder föredras att använda, till exempel den pågående droppen.

SIM -mediet tillåter att skilja vissa specifika egenskaper som kännetecknar vissa bakterier i förhållande till andra. Till exempel Escherichia coli kännetecknas av att vara h₂S (-), indol (+) och rörlighet (+), medan Proteus Mirabilis det är h₂S (+), indol (-), rörlighet (+).

[TOC]

Grund

Det är en kultur betyder som betraktas som differentiell, eftersom dess användning lyckas skilja mellan de mikroorganismer som kan producera vätesulfid från dem som inte gör det; Det belyser också de som bildar Indol från tryptofanen från de som inte bildas och slutligen differentierar de rörliga bakterier från orörliga.

Kraftkälla

Liksom alla kulturmedel har det element som ger nödvändiga näringsämnen så att icke -märkande mikroorganismer kan utvecklas. Dessa element representeras av Peptones och Triptein.

Utvecklingen av mikroorganismen i miljön är avgörande för att observera närvaron eller frånvaron av de egenskaper som detta innebär att utvärdera.

Vätesulfidproduktion

Bokstaven S för akronym SIM hänvisar till produktion av vätesulfid (h₂S). Bakterier som kan bilda vätesulfid tar natriumsulfat.

Kan tjäna dig: intra -specifik konkurrens: egenskaper, typer och exempel

När H är bildad₂S -GAS Colorless-, detta reagerar med järnsalt närvarande i mitten, bildar järnhaltig sulfid, tydligt synlig (svart fällning). Bakterierna som inte bildar H₂S, lämna det ursprungliga färgmediet (beige).

Närvaron av svart fällning kan hindra tolkningen av rörlighet. Det är emellertid känt att de flesta HT -producerande enterobakterier₂S är positiv rörlighet, såsom Salmonella, Proteus och Citrobacter. Dessutom antyder den svarta fällningen som täcker nästan hela mediet positiv rörlighet.

Indolbildning

Den andra bokstaven i förkortningen Sim är "I", som representerar bildandet av Indol.

I detta avseende uppfyller Tripteine, förutom att vara en källa till näringsämnen, en annan grundläggande funktion. Denna pepton är rik på en aminosyra som kallas tryptofan, därför kan den visa bakterier som producerar triptofanas.

Detta enzym är ansvarigt för clivar till triptofansaminosyran, med den därmed bildandet av indol (färglöst substans), pyruvinsyra och ammonium.

Det är därför, för att visa denna reaktion är det nödvändigt. Endera av de två reagerar med indolen och bildar en rödfucsiaformad ring på agarens yta. Om Fuchsia -färgringen verkar tolkas Indol -testet som positivt.

Bakterierna som inte har detta enzym, kommer inte att bilda ringen och tolkas som ett negativt indolest.

Det är viktigt att notera att Indol -beviset måste vara det sista som tolkas, eftersom när reagenset har lagts till, hindrar mediet visualiseringen av rörlighet.

Rörlighet

Slutligen betyder bokstaven "m" av ordet Sim Motility. För att utvärdera rörlighet är detta medium strategiskt halvfast, eftersom denna egenskap är avgörande för att observera om det finns bakterierörelse eller inte. Bakterierna som har flagella är de som ger detta positiva test.

Kan tjäna dig: t -lymfocyter: struktur, funktioner, typer, mognad

Ett positivt test kommer att bevisas när turbiditet observeras, både i den initiala inokulum och runt detta. Medan icke -mobila bakterier bara utvecklas på den första inokulumresan.

Förberedelse

SIM -medium

Väg 30 gr dehydratiserat medium och lösas upp i en liter destillerat vatten. Blandningen är kvar i vila i 5 minuter och upphettas sedan tills den kokas, ofta omrörning tills dess fullständiga upplösning.

Distribuera blandningen i provrören med bomullslock och autoklavat vid 121 ° C i 15 minuter. Ta bort racket med autoklavrör och låt stelna i en vertikal position så att mediet är i form av en taco.

För bevarande sparas det i kylen tills den användes. Det beredda mediet måste ha ett slutligt pH på 7,3 ± 0,2.

Vid inokulering av mediet måste detta vara vid rumstemperatur. Färgen på mediet är beige.

Kovacs reagens

Mät 150 ml amyl eller isoamyl eller butylalkohol. (Använd en av de tre nämnda).

Lös upp 10 gr p-dimetylaminobensaldehyd. Tillsätt sedan långsamt 50 ml koncentrerad saltsyra.

Reagenset klart för användning är färglöst eller klart gult. Det måste förvaras i bärnstensflaskan och förvaras i kylen. Använd inte om du tar en mörkbrun färg; Det indikerar att det är skadat. Detta reagens föredras när det gäller enterobakterier.

Erlich reagens

Väg 2 gr p-dimetylaminobenzaldehyd och lös upp i 190 ml absolut etylalkohol och blandas långsamt med 40 ml koncentrerad saltsyra. Håll Kovacs reagens på samma sätt. Ehrlichs reagens används mer för icke -fermentering och anaeroba bakterier.

Ansökningar

SIM -mediet används starkt i Bacteriology Laboratories. Det har som en fördel att tre väsentliga egenskaper kan observeras vid identifiering av Enterobacteria.

Kan tjäna dig: ättik jäsning: egenskaper, tillämpningar, exempel

Såtas

Det rätta sättet att så detta medium är att använda nålen, med vilken en del av den rena kolonin för att studera tas och sätts in i mitten av medium vertikalt. En enda lung måste göras. Punkteringen ska inte nå rörets botten, rätt är att täcka bara två tredje parter.

Det är inte tillrådligt att upprepa ympningen, eftersom detta kan bära falska tolkningar av positiv rörlighet. Det ympade mediet inkuberas vid aerobios vid 37 ° C under 24 timmar.

När tiden är över observeras det om det fanns en produktion av H eller inte₂S och läs rörligheten. Slutligen avslöjas Indolen och lägger till 3 till 4 droppar av Ehrlich eller Kovacs reagens, blandat försiktigt och tolkas.

Källa: Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. 5: e upplagan. Pan -amerikanska redaktionella.TILL. Argentina.

QA

Som sterilitetskontroll inkuberas ett eller två rör utan inokulering i 37 ° C per 24 timmar. Det förväntas att det efter denna tid inte finns någon tillväxt eller färgförändring.

Som kvalitetskontroll kan du använda certifierade kända stammar, till exempel: Escherichia coli ATCC 25922, Enterobacter aerogenes ATCC 13048, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Shigella Sonnei ATCC 29930, Proteus Vulgaris ATCC 13315.

De förväntade resultaten är: Escherichia coli H₂S negativ, indol och positiv rörlighet, Enterobacter aerogenes Endast positiv rörlighet, Salmonella typhimurium H₂S och positiv rörlighet, med negativ indol. Proteus Vulgaris Allt positivt, så länge som Klebsiella pneumoniae och Shigella Sonnei Allt negativt.

Begränsningar

-Några påslag av Morganella Morganii, Bland andra stammar kan producera ett brunaktigt pigment i detta medium på grund av melaninproduktion, bör detta inte förväxlas med den järnhaltiga sulfidutfällningen. I oerfarna proffs kan denna situation generera falska positiva effekter i tolkningen av H -testet₂S.

-Strikta aeroba bakterier kommer endast att växa på rörets yta, vilket hindrar tolkningen av rörlighet.

Referenser

1. BD Laboratories. BBL SIM Medum. 2008. Finns på: BD.com
2. Neogen Laboratories. Simin medum. Finns på: FoodSafety
3. Difco Francisco Soria Melguizo. Simin medum. 2009. Finns på: http: // f-soria.är
4. Brizuela-laboratorium.  Genomsnittlig sim. Tillgänglig i: .Brizuela-lab.com
5. Britania Laboratories. Genomsnittlig sim. 2015. Finns på: Studyres.Det är/doc
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. 5: e upplagan. Pan -amerikanska redaktionella.TILL. Argentina.