Förberedelse av kulturmedia

Beredningen av kulturmedia är en metod för att odla mikroorganismer för att studera dem

Vad är beredningen av kulturmedier?

De Förberedelse av kulturmedia Det är en rutinmetodik som används i laboratorier för tillväxt av önskade mikroorganismer. Kulturmediet är solida, flytande eller halvfasta beredningar som alla nödvändiga näringsämnen för utvecklingen av en mikrobiell befolkning har.

I allmänhet är medlen för att odla mikroorganismer rika på proteiner och aminosyror och innehåller vanligtvis en del komponent som gynnar tillväxten av den organisme som du vill studera, till exempel vitaminer, blod, serum, bland andra.

Det finns inget sätt att allmänna eller universell kultur, eftersom dess sammansättning varierar beroende på behoven hos mikroorganismen av intresse. Vissa bakterier kan utvecklas i vilket odlingsmedium som helst, men andra har speciella krav.

Vad består det av?

Mikroorganismer, såsom svampar och bakterier, kan inte studeras individuellt på grund av deras mikroskopiska storlek. Därför måste de odlas i konstgjorda medier som möjliggör den betydande ökningen av befolkningen.

Om vi ​​till exempel vill studera bakterier måste vi ge dem lämpliga förhållanden så att de kan sprida sig och bilda en koloni (som kan observeras med blotta ögat).

Beredningen av kulturmedier varierar mycket beroende på vilken typ av mikroorganism som du vill växa. Innan du förbereder det är det nödvändigt att känna till de grundläggande näringsbehovet i arbetsorganismen.

De vanligaste komponenterna som används i grödor kommer att beskrivas nedan för att ha en allmän uppfattning om dess förberedelser:

Agar

Det används i grödor som gelningsmedel och lägger till när ett fast eller halvt fast medium söks. Det första stelningsmedlet som användes i mediapreparatet var gelatinet, men 1883 introducerades agaren i Bakteriologiens värld av W. Hesse.

Den bakteriologiska typen har som huvudkomponent en polysackarid av komplexa förgreningar, extraherade från alger. Denna förening används som en förtjockare av vanlig mat, såsom glass och sylt.

Det är ett mycket värdefullt element i mikrobiologi av flera skäl. I huvudsak, eftersom mikroorganismer inte kan försämra det, är flytande vid en temperatur av 100 ° C och förblir i ett flytande tillstånd tills det når 45 ° C eller mindre.

Om du vill förbereda ett fast medium måste agarkoncentrationen vara cirka 1,5%, medan semi -soliderna måste beredas från 0,3 till 0,5%.

Vätska

Odlingen av patogena organismer behöver kroppsvätskor så att de kan utvecklas som de skulle göra i sin naturliga miljö.

Kan tjäna dig: protesgrupp

Av denna anledning tillsätts komplett eller defibrerat blod. Vätskan extraheras från ett friskt och, när steriliserat djur, tillsätts i odlingsmediet.

Extrakt

De erhålls från olika djurdelar (såsom kött eller lever) eller grönsak (frön) och bearbetas för att få ett fast koncentrat i form av pasta eller damm.

De vanligaste är extrakten av jäst, malt och kött.

Peptonor

Dessa organiska föreningar erhålls av enzymatiska eller kemi hos djur eller växtvävnader. Syftet är att lägga till rikt innehåll i aminosyror, som är de grundläggande enheterna av proteiner.

Stötdämpare

"Buffertarna" eller stötdämpande system undviker plötsliga förändringar av pH och hjälper till att upprätthålla det optimala intervallet som tolererar organisme.

De flesta organismer kan utveckla ett pH på 7, även om vissa bakterier föredrar alkaliska medier. Det finns emellertid bakterier som motstår variationer av pH mellan värdena 6 och 9.

I pH -känsliga arter produceras skador inte av den överdrivna mängden väte eller hydroxyljoner, utan av ökningen av svaga syror eller baser som kan penetrera cellen.

På samma sätt läggs pH -indikatorer för att kunna övervaka det och undvika avvikelser orsakade av jäsningar eller andra processer.

Mål

Huvudmålet när man förbereder ett odlingsmedium är att lägga till alla nödvändiga komponenter för att möjliggöra en framgångsrik utveckling av organismen som vill isoleras. Kombinationen av mer effektiva komponenter och näringsämnen för att uppnå önskade medel måste identifieras.

Både beredning och medium lagring är avgörande för att säkerställa en framgångsrik tillväxt, eftersom dessa steg beror på miljöens sammansättning och näringsämnennas tillgänglighet.

Det bör beaktas att odlingen av mikroorganismer är en uppgift som påverkas av flera faktorer som är externa för kulturmiljön, såsom intensiteten av ljus som mottagits, temperatur och nivån av surhet eller alkalinitet i mediet.

Därför måste var och en av dessa variabler beaktas och övervakas noggrant.

Typer av media

Baserat på dess sammansättning

Baserat på dess sammansättning finns det tre huvudtyper av grödor: naturliga eller empiriska, halvsyntetiska och syntetiska eller kemiska medel.

Naturlig miljö

I naturliga medier är den exakta sammansättningen okänd. Dessa inkluderar ingredienser som mjölk, utspädd blod, växtjuicer, extrakt och infusioner av kött och peptoner.

Av ekonomiska skäl tillsätts vanligtvis lågkostnadskomponenter, såsom sojaextrakt, serum, melass, etc.

Kan tjäna dig: Support: Egenskaper, funktioner och exempel

Halvsyntetisk media

Det kallas den semi-syntetiska om sammansättningen av samma är delvis känd. Varje medium som innehåller agar är ett semi-syntetiskt medium.

Bland dem har vi dextrospotatis, czapek-dox-agar, havregryn, köttpepton grepp, bland andra exempel.

Syntetiskt eller kemiskt definierat medium

I detta fall är sammansättningen av mediet - som för mängden kol, kväve, svavel, fosfor och annan tillväxtfaktor helt känd - är helt känd.

Det är mycket användbart om du vill få reproducerbara resultat för andra forskare.

För de så kallade "mikroorganismerna med speciella tillväxtkrav" måste du lägga till nödvändiga komponenter. Ett exempel på denna typ är Laktobacillus.

Baserat på typen av mikroorganism

På samma sätt finns det en annan klassificering för kulturmedia baserat på vilken typ av mikroorganism som kan växa i den.

Efter denna princip har vi följande: allmänna medel, anrikning, selektiva och differentialer. Var och en beskrivs nedan:

Allmänna medel

Dessa medger utvecklingen av en mängd olika mikroorganismer. Om någon organisme behöver särskilda förhållanden för tillväxten kommer den inte att kunna utvecklas framgångsrikt i denna typ av gröda.

Anrikningsmedium

Anrikningen innebär att tillväxt av en viss typ av mikroorganism, men inget ämne har lagts till för att förhindra att andra typer av mikrober växer i den.

Selektiv medel

De söker den specifika tillväxten av en mikroorganism, samtalssvampar, bakterier, protozoer, bland andra. För att göra detta hämmar de andras utveckling.

För att uppnå detta mål kan dödliga kemiska föreningar läggas till för en bred grupp mikroorganismer och ofarliga för intresset eller att lägga till energikällor som endast är assimilerbara av mikrob -sökts.

Selektiva media används när medicinska prover tas för att odla viss patogen mikroorganism. Här är det nödvändigt att gynna tillväxten av patogen och hämma utvecklingen av normal mikrobiell flora från patienten.

Bismut sulfitagar tillåter till exempel inte tillväxten av Gram -positiva bakterier och ett stort antal bakterier som finns i mag -tarmkaviteten.

Därför används den för att odla de gram -negativa bakterierna som orsakar tyfusfeber, Salmonella Typhi, I fekala prover.

Differentiellt medel

Denna typ använder en viss diagnostisk egenskap för organismen av intresse (särdrag i dess ämnesomsättning, till exempel) för att kunna identifiera dem mot en annan art som växer i samma medium.

Det kan tjäna dig: Transfases: Vad är, funktioner, nomenklatur, underklasser

Både differentiella medier och selektiva medel är mycket användbara inom området klinisk mikrobiologi och folkhälsa, eftersom dessa discipliner måste upptäcka närvaron av specifika mikroorganismer relaterade till patologier eller dåliga hygienförhållanden.

Du kan lägga till indikatorämnen i grödan som ger en siktad inställning till den eftertraktade kolonin. Till exempel till den medelstora agar-eosin-rulen av metylen (förkortat EMB) och agar-macconey läggs till laktos och en pH-indikator.

Således, när en koloni utvecklas i dessa media med förmågan att fermentera laktos och producera aldehyder, kan de observeras i en speciell färg.

Steg för beredning av kulturmedia

För närvarande kan odling köpas på ett lyofiliserat sätt. Därför underlättas förberedelserna och endast produkten kvarstår.

Innehållet måste vara tungt (med hänsyn till det slutliga beloppet du vill förbereda) och upplöstes i destillerat vatten efter alla produktindikationer.

Innehållet i flytande media måste delas upp i de önskade behållarna (petriplattor, rör etc.) för efterföljande sterilisering.

För att distribuera det fasta mediet är det nödvändigt att smälta det med en mikrovågsugn eller skicka in materialet till ett vattenbad. Medium pH måste justeras.

Vanligtvis används agaren i provrör eller i petriskylt. Om agaren stelnar i ett lutande läge, med lämplig vinkel för att den slutliga terminalkanten ska vara diagonal, kallas den flöjt eller lutande pico -rör.

När agaren stelnar i en helt vertikal position ges det namnet "Deep".

Efter att ha steriliserat media - med en autoklav - låter de dem svalna. Dessa måste manipuleras i en miljö fri från mikroorganismer, det vanligaste är att arbeta med en lättare tändning som säkerställer en aseptisk miljö i dess närhet.

Referenser

1. Celis, j. OCH. (2006). Cellbiologi: en laboratoriehandbok (Vol. 2). Annars.
2. Finygold, s. M., Bailey, w. R., Baron, E. J., Fineglod, s. M., & Scott, och. G. (1991). Bailey Scott: Mikrobiologisk diagnos. Pan -amerikansk medicin.
3. Olivas, e. (2004). Mikrobiologi och II och parasitologiska metoder manual. Autonoma University of Ciudad Juarez.
4. Schlegel, h. G., & Zaborosch, c. (1993). Mikrobiologi. Cambridge University Press.
5. Tortora, g. J., Funke, b. R., & Fall, c. L. (2007). Introduktion till mikrobiologi. Ed. Pan -amerikansk medicin.