Xantoproteic reaktionsstiftelse, procedur, användning

De Xantoproteicreaktion Det är en kemisk procedur som används för att bestämma närvaron eller frånvaron av aromatiska aminosyror, såsom tyrosin och tryptofan, som kan vara fria eller utgöra lösliga proteiner, peptider eller polypeptider.

Det har också använts för att upptäcka giftiga ämnen på blodnivån som innehåller en beankenisk grupp i dess struktur. Detta test är också känt som Becher xantoproteic reaktion.

Positiv xantoproteic reaktionskälla: Hämtad från video: https: // youtu.Vara/gzgmbw5w4wo

Xantoproteic -reaktionen använder koncentrerad salpetersyra, värme och en neutraliserande alkali. Om den gula till orange lösningslösningen, när den neutraliserar reaktionen, anses vara positiv. Den observerade färgningen beror på bildningen av kväveföreningar härrörande från nitrifikationen av benseniska grupper.

Om du behöver kvantifiera mängden totala proteiner är det nödvändigt att använda andra proteinbestämningsmetoder, såsom Biuret.

Xantoproteic -reaktionen används huvudsakligen när ämnen analyseras som dess kemiska sammansättning inte är känd. I allmänhet är denna reaktion en del av en uppsättning tester som hjälper till att bestämma den kemiska sammansättningen av ett specifikt ämne eller extrakt. Det är därför det används allmänt av forskare.

Å andra sidan används Becher's xantoproteic -reaktion för att upptäcka fenoliska och indoliska ämnen i blodet, vilket är möjligt att förutsäga utseendet på nefropati, innan andra fler parametrar ökas.

[TOC]

Grund

Reaktionen upptäcker i princip närvaron av den benseniska gruppen, båda i aminosyror, som i proteiner och peptider. Kalpitalsyran verkar på aminosyran bencenisk ring som har den och bildar fenoliska nitrokompositioner.

Reaktionen behöver värme för att genomföras, vanligtvis bildas en fällning som molnen med mediet, vilket gör det mjölkigt. Fällningen kan vara vit eller gul. Slutligen kräver det ett alkaliseringssteg som accentuerar färg. För detta används en bas som 40% eller ammoniak -natriumhydroxid.

Reaktionen kommer att tolkas som positiv om en stark gul färg observeras under den mörka uppvärmningen eller orange processen genom att alkalisera reaktionen. De upptäckta aminosyrorna är huvudsakligen tyrosin och tryptofan.

Xantoproteicreaktion. Källa: http: // esteroisomeras.Bloggfläck.com/2013/06/karaktärisering av proteiner.Html

När det gäller fenylalanin, även om det är en aromatiska aminosyror, är bensenkärnan i denna aminosyra svår att nitatiseras i en enkel reaktion, därför kommer den att avge eller en negativt eller svagt positiv reaktion.

Kan tjäna dig: polaritet (kemi): vad är, definition, exempel

I allmänhet kan xantoproteic-testet kompletteras med Hopkins-Cole-testet, som tjänar till att specifikt identifiera triptofan. Om xantoproteic-testet är positivt och för Hopkins-Cole är negativ, kasseras närvaron av tryptofan i den lösningen, vilket leder till närvaron främst av tyrosin. På samma sätt kan det också kompletteras med Millons reaktion för tyrosindetektering, bland annat.

Denna reaktion kan också användas på blodprover, plasma eller oförändrat serum för diagnos av uremi eller njurinsufficiens. I det här fallet är det som söks upptäckt av giftiga ämnen (fenol och indoler) som produceras från tarmrot.

Dessa ämnen har den benseniska gruppen och ger därför en positiv xantoproteisk reaktion, även om de reaktionära substanserna varken är en aminosyra eller ett protein.

Procedur

- Xantoproteic -reaktion för aminosyradetektering med aromatiska grupper

Placera 1 ml av problemprovet i ett rent och torrt provrör.

-Tillsätt 0,5 ml koncentrerad salpetersyra.

-Inkubera blandningen i ett badrum på 70 ° C i 2 minuter. Tidigare förbered Maria -badet vid den ovannämnda temperaturen.

-När du tar röret från Maria -badet är det möjligt att observera att lösningen har blivit mjölkig och har tagit lite gulaktig vit färg.

-Lösningen kyls genom att släppa kallt vatten vid rörets bas.

-Beredningen påstås långsamt (droppe för droppe) en 40% natriumhydroxidlösning tills det finns en färgchock.

-Om testet är positivt, kommer en mörk orange ring att bildas i vätskegränssnittet.

-Om reaktionen är negativ kommer det inte att bli någon färgbildning.

- Xantoproteic -reaktion för att upptäcka fenoliska och indoliska ämnen i blodet

-Dispens 5 cm triklorättiksyra vid 20% över 5 cm venöst blod, plasma eller serum, den senare är den mest indikerade. Blanda väl och filtrera.

Kan tjäna dig: salpetersyra (HNO3)

-2 cm av filtreringen tas och blandas med 0,5 cm salpetersyra. Sedan värms det upp till kokning, för detta placeras röret direkt på lättaren i 30 sekunder. Kyls med vatten och tillsätt 1,5 natriumklorid vid 33%.

Det tolkas på följande sätt:

-Negativt resultat: gulaktig färg.

-Positivt resultat (+) citrongul.

-(++) guldgul.

-(+++) Mörkgul till brun

Det kan också tolkas med hjälp av en referens colorimetrisk skala av Auenrieth, bestående av olika koncentrationer av kaliumbikromato. Detta framställs i utspädningar av 10 av 10 från en moderlösning på 0,03874%. Varje rör representerar en procentandel.

Tolkningsskalor

Det finns två tolkningsskalor som kallas forntida och moderna. De normala värdena är:

Gammalt bord: mellan 75 och 85%

Modernt tabell: Mellan 15 och 25%

Om färgen på problemröret är i mitten av två mönster rör görs ett genomsnitt mellan båda måtten.

Kaliumdikromatmönsterlösningen framställs enligt följande: 7 mäts.9 ml kaliumdikromat vid 10 N och är spolad upp till 100 ml i en Aggorado -boll. För utspädningar följs det som det visas i den kolorimetriska tabellen i autenrieth.

Colorimetric Table of Autenrieth. Källa: Vásquez a. Xantoproteicreaktion. Spansk klinisk tidning. 1949; 35 (5): 326-327. Finns på: Elsevier

Använda sig av

Användningen av xantoproteicreaktionen är en del av en uppsättning biokemiska tester som hjälper till att känna till den kemiska sammansättningen av ett okänt ämne. Detta test bidrar till den kemiska analysen Detekteringen av proteiner som innehåller benseniska grupper i deras struktur.

Denna reaktion används allmänt av forskare i olika substansstudier.

I detta avseende använde Vásquez-Jorge och kollaboratörer detta och andra reaktioner för att undersöka proteininnehållet hos vätskor extraherade från Mangrove Osttion (Crassostrea Rhizophorae).

Likaså använde Rojas och kollaboratörer (2009) en serie tester, bland vilka xantoproteic -reaktionen, för att analysera glycomacropéptides i utfällningar av Lactosueros de Ricotta.

Å andra sidan modifierades Becher's xantoproteic -reaktion av Volhard som skulle användas för andra ändamål. I detta fall, för upptäckt av fenoliska och indoliska ämnen som kan höjas mycket tidigare (veckor eller månader) att nivåerna av urea och restkväve i blod ökas.

Det kan tjäna dig: cerio: struktur, egenskaper, erhållning, användning

Dessa giftiga avfall bildas av tarmrot av mat.

Dessa ämnen ackumuleras i blodet när de inte elimineras ordentligt, därför kan ett positivt xantoproteic -test förutsäga den snabba etableringen av njursvikt själv eller ett tillstånd av uremi.

Enligt färgintensitet kan du bestämma hur avancerad den är. I detta fall är testet kvantitativt.

Hos friska människor ger detta test en lätt gul färg, motsvarande de normala nivåerna av tryptofan och tyrosin som kan vara i blodet.

Medan hos njurpatienter ger xantoproteic -reaktionen starkt positiv på grund av närvaron av följande ämnen: fenol, indol, paracresol, aromatiska oxysyror, bland andra.

Försiktighetsåtgärder

Detta test måste utföras av utbildade proffs. Alla normer för biosäkerhet bör övervägas, eftersom de använda reagenserna är syror och frätande baser.

Om några droppar salpetersyra på huden eller naglarna faller av misstag kommer de att bli gula, eftersom båda strukturerna innehåller proteiner. Dessutom på huden och slemhinnorna orsakar det allvarliga brännskador.

Om en kontakt med huden inträffar måste protokollet som ska följa vara att tvätta området omedelbart med tvål och vatten i cirka 20 minuter.

Om du stänker ögonen måste du tvätta med mycket färskt vatten och försöka hålla ögonen öppna.

Referenser

1. "Xantoproteica -reaktion" Wikipedia, fri encyklopedi. 2 september 2019, 17:49 UTC. 21 oktober 2019, 20:31 Wikipedia.org/
2. Vásquez-Jorge och, Guerra-Molina L, Quintana-Tamayo J, Ramírez-Arzuaga J, Fernando-Ballesteros R, Vásquez-Jorge och. Fysikalisk -kemisk karakterisering och proteininnehåll i vätskextrakt av mangrove ostion (Krassostrea Rhizophorae). Kubansk kemi, 2014; 26 (1): 66-74. Finns i Redalyc.
3. Rojas E, Valbuena E, Torres G, García A, Piñero M, Galindo L. Isolering och prestanda för GMP genom laktosuero nederbörd med triklorättiksyra. Forskare. (Maracaibo) 2009; 19 (3): 295-302. Finns på: VE.Scielo.
4. Vásquez a. Xantoproteicreaktion. Spansk klinisk tidning. 1949; 35 (5): 326-327. Finns på: Elsevier
5. Gálvez I, Gárate eller. Becher och Andrewes reaktioner i urinkirurgi. Spansk sjukhus urologi. Argentinska Magazine of Urology 395-404