Kongo röda egenskaper, förberedelser och applikationer

han Kongo Red Det är ett protein azoiskt färgämne, bildat genom kopplingen av ett diazoniumsalt och en aktiv aromatisk ring. Detta ämne kan absorbera elektromagnetisk strålning i det synliga spektrumet, varför det presenterar en intensiv färg.

Det är negativt laddat. Därför har den en affinitet för positivt laddade cellkomponenter, som vissa proteinämnen. Dess färg varierar beroende på PH. I detta avseende, om mediet är syra (pH 5,2 färgen är intensiv röd.

Röd dehydratiserad och kolloidal lösning av Kongo. Källa: Pixinio.com och wikipedia.com

Det är ett mycket mångsidigt ämne, eftersom det har flera verktyg. Det har använts som ett färgämne i textilindustrin och även för celler och vävnader.

Också för att utföra odlingsmedier som mäter enzymatisk verkan, som en pH -indikator, som ett kontrollämne i utvärderingen av korrekt funktion av spektofotometrar, i studien av biofillerbildning eller vid diagnos av amyloider.

På samma sätt har det tillåtit att skilja bakteriella och svampserotyper genom identifiering av specifika strukturer i dess vägg (lipopolysackarider).

[TOC]

Kargo Red

Detta ämne upptäcktes av Böttiger 1884. Det är ett diazoniumderivat som bildas av bis-diazoiken i benchnin med naftionsyra. Kongo -röda molekylen mäter 21 Armstrong och molekylvikten är ungefär 8000 g/mol.

Kongo rött kännetecknas av att vara löslig i vatten, och ännu mer i organiska lösningsmedel såsom etanol, bildar en kolloidal lösning.

Den har en affinitet för cellulosa, av amyloidvävnaden och med positivt laddade cellkomponenter.

Förberedelse

Kongo rött framställs i olika koncentrationer beroende på den teknik som ska användas. De flesta använder Congo Red till 1%, 2%, 0,1%, bland andra.

För att förbereda 2% Kongo måste till exempel väga 2 g dehydratiserat färgämne och tillsätt 100 ml destillerat vatten. Sedan lagras den i en bärnstensflaska.

Ansökningar

Som färgämne i textilindustrin

En stund användes det allmänt inom textilindustrin på grund av dess fixering i bomull, men den avvisas för närvarande eftersom den är cancerframkallande och också för att färgen inte är stabil, missfärgning genom friktionen.

Kan tjäna dig: Chimotripsin: Egenskaper, struktur, funktioner, handlingsmekanism

Bestämning av bildningskapaciteten för biofilmer

Det har visats att mikroorganismen Biofillerbildningskapacitet är en virulensfaktor.

I detta avseende används Kongo Red Dye som en metod för att bestämma biofilmbildning. Kongo Red binds till exopolisackchariderna som finns i biofilmen. Jämfört med andra metoder rekommenderas dock minst de höga falska negativerna som inträffar.

Metoden använder Congo Red Agar, detta består av blodagar som bas, glukos (10 g/l) och Kongo -rött färgämne (0,4 g/l). Stammarna som ska utvärderas sås i mitten och inkuberas i 24 timmar till 37 ° C och inkuberas därefter i 48 timmar vid rumstemperatur.

Ett positivt test bevisas om kristallina kolonier av svart och torrt utseende observeras.

Spectofotometers kvalitetskontroll

För att utvärdera om absorbans- eller bearbetningsmätningsutrustning uppfyller de fotometriska parametrarna som fastställts enligt internationella föreskrifter, kan en enkel teknik utföras som gör det möjligt att fastställa om utrustningsresultaten inom acceptabilitetsområdena.

En av utvärderingsteknikerna är att använda Kongo Red, baserat på den isosetiska punkten.

Det kallas isosetisk punkt till våglängden som Kongo Red avger samma absorbans oberoende av pH, koncentration och temperatur. Absorbansvärdet är fixat och kan användas som referens.

Det är känt att den teoretiska isosbetiska punkten för Kongo Red är 541 nm. Om det erhållna värdet är annorlunda är det känt att utrustningen ger problem med våglängdsskiftet och måste granskas av en specialiserad tekniker.

Förberedelse av kulturmedia

Ortiz och kollaboratörer beskriver ett odlingsmedium framställt med Kongo -röd färg och karboximetylcellulosa som kallas CMC -agar för att upptäcka cellulitiska mikrobiella stammar; Det vill säga cellulära producenter (endoglukonesiska, exoglukanas och ß-glukosidas).

Detta medium har en intensiv färg. Färgen kommer att spridas genom verkan av endoglucanasenzymet som bryter strukturen för karboximetylelulosen. Detta antyder en positiv reaktion.

Kan tjäna dig: fixistteori: koncept, postulat och författare

Minskningen av viskositet och absorbans möjliggör kvantifiering av enzymaktiviteten. Till exempel i stammar av Streptomyces sp.

Identifiering av mikroorganismer

Kongo Red har affinitet för polysackaridstrukturer av vissa stammar och uppnår identifiering av dessa mikroorganismer. Bland dem är Escherichia coli, och den Shigella flexneri.

Kongo röda agarplattor används också för att få karakteristiska kolonier, till exempel  Azospirillum sp, vilket ger skarlakansröda kolonier, bland annat.

Cell- och vävnadsfärgning

En av de vanligaste tillämpningarna av Kongo Red är dess användbarhet vid diagnosen amyloidos. Denna konstiga sjukdom består i den extracellulära ansamlingen av ett onormalt protein i olika organ. Detta anomala protein produceras i benmärgen och kallas amyloid.

Kongo Red har en hög affinitet för detta ämne. Denna egenskap har använts för att demonstrera sin närvaro i histologiska vävnader. Kongo rött används bredvid hematoxylin/eosin för detta ändamål.

Föreningen mellan amyloidvävnaden och Kongo -rött ges genom de icke -polära vätebindningarna, mellan karboxylgrupperna och aminogruppen. Amyloidproteinet tillhandahåller karboxylgrupperna (COOH) och Kongo röda aminogruppen.

Amyloidvävnaden är färgad i olika nyanser som sträcker sig från rosa till intensiv röd sett vid det optiska mikroskopet. I mikroskop med dubbel polariserat ljus observeras dessa beredningar med en äppelgrön patognomonisk birrefringnce.

Det vill säga de presenterar dikroism, eftersom amieloidfibrer är anisotropiska. Denna observation bekräftar diagnosen.

Färgen av Kongo -röda vävnader är kompatibel med andra diagnostiska metoder, såsom immunocytokytiska metoder, att kunna till och med presolera.

Som pH -indikator

Egenskapen att svänga framför pH -förändringar används av tekniken som kallas kromoendoskopi.

Denna teknik använder målarbok och pH -indikatorer som gör att vissa patologier kan detekteras. Bland dem är användningen av Kongo Red, som kan avslöja tidiga cancerstrålkastare i magslemhinnan, som används som en surhetsmarkör.

Kan tjäna dig: pyrimidiner: egenskaper, struktur, funktioner

Tekniken är baserad på det faktum att rött pH -rött är svart är svart. Därför, efter att ha placerat en lösning av Kongo -rött på magslemhinnan, kommer de områden där det finns blekhet att ta provet för biopsi att väljas, det vill säga där det inte finns någon syraproduktion. Detta antyder förekomsten av cancerfokus eller förlust av parietalceller.

Referenser

1. “Kongo Red." Wikipedia, fri encyklopedi. 8 maj 12:13 UTC. 16 maj 04:08 är.Wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Ny metod för kvantifiering av endoglucanasaktivitet baserad på cellulosa-rojo-komplexet Kongo. Orinoquia [internet]. 2011 juni [citerat 2019 15 maj]; 15 (1): 7-15. Tillgänglig från: Scielo.org.
3. Peña J, Uffo eller. Biofilmproduktion i genotyper av Staphylococcus aureus Bovin mastit isolerad på Kuba. Rev Health Anim.  [Internet]. 2013 dec [citerad 2019 16 maj]; 35 (3): 189-196. Finns på: Scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. Kutan manifestationer av systemisk amyloidos som diagnostisk nyckel: klinisk fall. Varv. Méd. Chile [Internet]. 2012 april [citerat 2019 16 maj]; 140 (4): 499-502. Finns på: Scielo.
5. Duymovich C, Acheme R, Sessini S, Mazziotta D. Spektrofotometrar och fotokolloimetrar praktisk uppdateringsguide. Latinamerikansk klinisk biokemi [online] 2005, 39 (Septue-Always): [Datum för samråd: 15 maj 2019] tillgängligt på: Redalyc.org
6. Marín J, Díaz J och Solís J. Kromoendoskopi i infektion av Helicobacter pylori: Är det en reaktionstid? Rev ESP Savm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Organisk kemi. Redaktör. Barcelona, ​​Spanien. Finns på: böcker.Google.co.gå
8. Murillo m. Histologiska färgningstekniker. University of Guadalajara, Mexiko. Finns på: Academy.Edu
9. Paillié m. Bestämning av cellulolitisk, ligninolitisk och amilolitisk aktivitet av isolerade aktinobakterier av rhizosfärisk jord av vit klöver (Trifoliumreng).2012. Pontificia Universidad Javeriana Fakulteten för vetenskaper Industrial Microbiology Bogotá D.C. Finns på: arkiv.Javeriana.Edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R, & Baldani V. Isolering och identifiering av stammar av Azospirillum sp. I Guinea Pasto (Panicum maximalt jacq.) Del Valle del Cesar. Betesmarker och foder, 2010; 33 (3): 1-8 tillgänglig på: Scielo.