Half Stuart Foundation, förberedelser och användningar

han Halvstuart Det är en halvsolid agar eller en buljong utan näringsämnen, som används för transport av biologiska prover. Syftet är att hålla stammarna närvarande i provet livskraftiga under en viss tid, men utan att öka den mikrobiella populationen.

Det skapades av Moffet, Young och Stuart 1948 och modifierades därefter av Toshach och Patsula. Det består av natriumglyofosfat, natriumtioglycoat, kalciumklorid och agar-adding. Det senare är närvarande i det halvtolid och frånvarande mediet i vätskan. Vissa laboratorier lägger till metylenblått.

Kulturett med Stuart -transport. Källa: av: CDC/DR. Gilda Jones, Courtesy: Public Health Image Library

De används vanligtvis när det inte är möjligt att så provet omedelbart. I detta fall placeras provet i transportmedel, medan det överförs till laboratoriet som kommer att bearbeta grödan.

På detta sätt är det garanterat att de närvarande mikroorganismerna förblir levande tills de är inokulerade i motsvarande kulturmedium.

Ursprungligen var dess användning avsedd att transportera urinrörs- eller vaginalprover där närvaron av Neisseria gonorrhoeae. Därefter insåg de att deras användbarhet kunde vara bredare.

Stuart -mediet visade sig vara mycket effektivt i bevarande av labila och irriterande mikroorganismer som Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium difteriae, Bordetella pertusis, bland andra. Förutom andra icke -aningande mikroorganismer som Enterobacteria.

Stuart -mediet undviker i princip uttorkningen av provet, upprätthåller den osmotiska balansen och behåller mikroorganismer till ett idealiskt pH. Å andra sidan innehåller detta medium strategiskt inte näringsämnen, detta förhindrar att mikroorganismer multipliceras.

På marknaden finns det speciella show för att transportera prover som innehåller detta eller annat transportmedel, kallad kulturett. De kan också förberedas i laboratoriet.

[TOC]

Grund

Slutet på Stuart -transportmedlet är att hålla proverna närmast sitt ursprungliga tillstånd, tills det är bearbetat.

Natriumglyofosfat och kalciumklorid är ett buffertsystem som verkar genom att bibehålla pH och osmolaritet.

Medan natriumtioglycate fungerar som ett reducerande medel och i fallet med att innehålla detta ger den den halvsolidkonsistensen, för att försena syresättningen av miljön. Slutligen är metylenblått en oxidationsindikator, det vill säga den upptäcker närvaron av syre.

Kan tjäna dig: glykosaminoglicanos: egenskaper och funktioner

Det halvfasta mediet med redoxindikator är idealisk för transport av prover där närvaron av anaeroba bakterier misstänks.

Egenskaper för transportmedel

Stuart -mediet, som alla transportmedel, uppfyller vissa egenskaper, inklusive:

-Upprätthålla livskraftiga de mikrobiella stammarna som finns utan att multiplicera.

-Det innehåller inte näringsämnen; Dess föreningar syftar till att hålla provet hydratiserad, under tillräckliga förhållanden för pH och osmolaritet.

-Hämmar autolyserad av vissa känsliga mikroorganismer, såsom Pneumococcus.

-Användningen är tillfällig, den bör inte förlängas för mycket.

Förberedelse

Halva halvfast Stuart med redoxindikator

Hemlagad förberedelse

Ingredienser

Natriumglyofosfat 10 gr

Natriumtioglycoate 1.0 GR

Kalciumklorid 0.1 gr

Metylenblå 0.002 GR

Agar -agar 3 gr

Destillerat vatten 1 L

Blanda komponenterna och värma upp till den totala lösningen. Häll i rör eller speciella escobilloner. De introduceras i autoklaven och steriliseras vid 121 ºC i 15 minuter. Låt rören svalna vertikalt (i form av en taco). Rum vid rumstemperatur.

Förberedelser med kommersiellt medium

Väg 14,1 gr med mediet i 1 liter destillerat vatten. Värme ofta agiterar tills den totala upplösningen kan låta den koka. Resten av proceduren som redan beskrivits.

Det dehydratiserade mediet är grädde och beredd måste vara blått på ytan. Detta beror på närvaron av metylenblått.

Mediets pH måste justeras till 7,4 ± 0,2

Hälften modifierad flytande Stuart (hemlagad förberedelse)

Ingredienser

Natriumglyofosfat 10 gr

Natriumtioglycoate 1 gr

Kalciumklorid dihydratiserad 0,1 gr

1000 ml destillerat vatten

Den bär samma ingredienser som halvfast, men den bär inte agar eller metylenblått. I detta fall är komponenterna utan uppvärmning blandade och 0,5 ml fördelas i 16 x 125 mm rör med ett trådlock.

Det steriliseras i autoklav vid 121 ° C i 10 minuter. För provtagning -sam.

Kan tjäna dig: Matematisk biologi: Historia, Studieobjekt, applikationer

Rören lagras vid rumstemperatur.

Ansökningar

Kommersiellt finns det speciella enheter för att transportera prover som kallas kulturett; Den här enheten är ett långsträckt och tunt rör som ger en vattpinne och i slutändan finns det ett segment som innehåller halvsolid eller flytande Stuart -medium.

Enheten öppnas och med vattpinnen tar provet. Sedan införs det igen i röret tills spetsen på vattnet sätts in i mediet för halvfast transport; Vissa tar med sig en polyuretansvamp impregnerad med flytande Stuart -medium, med vilket provet bevaras när det håller sig vått.

I det fall närvaron av känsliga mikroorganismer misstänks, bör bomullsborgar med kol i prov användas.

De prover som kan tas med vattpinnar eller kvastar och överföras i detta medium är svalgala exsudater, rektala vattpinnar och olika sekret, inklusive: vaginal, urethrals, sår, okulära, otiska och abscesser.

Under överföringen av provet i transportmedel till laboratoriet bör inlämnandet av miljön till extrema miljöförhållanden (mycket kallt eller mycket värme) undvikas (mycket kallt eller mycket värme). Plötsliga förändringar av atmosfärstrycket bör också undvikas.

Den tid då mediet kan hålla en mikroorganism som är livskraftig kommer att bero på den aktuella stammen. Till exempel kan för mikroorganismer av släktet Neisserias och Haemophilus upprätthållas livskraftigt i upp till 24 timmar, men stammar som Salmonella eller Shigella kan hålla dagar och fram till veckor.

Om det uppskattas att provbehandling kan ta mer än fyra dagar är det att föredra att frysa provet vid -70 ° C.

Providentifiering i transportmedel

De förberedda transportmedierna eller den kommersiella kulturen måste ha en etikett där följande data kommer att placeras:

Patientens namn och efternamn: Undvik provtagningsförvirring.

Identifieringsnummer: Det är bekvämt att få en beställning på jobbet.

Källa till prov: Hjälp bakteriologen till valet av lämpliga kulturmedier.

Kan tjäna dig: kapselfärgning: Foundation och tekniker

Behandlande läkare: Ibland är det nödvändigt för möjliga samråd.

Datum och tid för prov: Det är nödvändigt för acceptans eller avslag på provet enligt den tid som förflutit mellan provet och mottagningen i laboratoriet.

Annan information som skulle vara mycket användbar för bilaga är:

Den presumtiva diagnosen: Guide för tillägg av specialkulturmedia enligt diagnostisk misstänksamhet.

Antibiotikabehandling: Det är användbart att fästas vid antibiogrammet.

All denna information är avgörande för att garantera provets goda bearbetning.

QA

För att utvärdera driften av Stuart -mediet kan du ympa kända och upprätthålla stammar vid 25 ° C, till exempel: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.

I alla fall förväntas det återvinna mikroorganismen i fråga, bevarad i 24 timmar.

Å andra sidan andra stammar som: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 och Escherichia coli ATCC 11775.

I alla fall förväntas en riklig återhämtning i upp till 96 timmar.

Begränsningar

Vissa studier säkerställer att glyceofosfat som finns i medium Stuart kan metaboliseras av vissa koliformer, bland andra gram negativa bakterier och därför multiplicerar i detta medium.

Denna risk ökar desto mer är behandlingen av provet försenad. På samma sätt påverkar utställningen av Stuart -mediet vid höga temperaturer under överföringen denna speciella.

Referenser

1. “Mitt i transport (mikrobiologi)." Wikipedia, fri encyklopedi. 13 april 2018, 10:36 UTC. 1 april 2019. Finns på: detta.Wikipedia.org
2. Microkit Laboratories: Culture Media. Stuart transportmedium. Finns på: Finns i: Culture Media.com
3. Lablisan. Stuart transportmedium. Finns på: Lablinsan.Kli
4. Vetenskaplig MDM. Fördelarna med att ha genomsnittlig mikrobiologisk transportstuart. Finns på: mdmcientify.com
5. Metrix Laboratories. Stuart. 2017. Finns på: MetrixLab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 ed. Pan -amerikanska redaktionella.TILL. Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. 5: e upplagan. Pan -amerikanska redaktionella.TILL. Argentina.