Vad är lentiviruset?

De Lentivirus, från latin lenti Vilket betyder långsamt, de är virus som kräver lång tid, mellan månader och år, från den första infektionen till sjukdomens utseende. Dessa virus tillhör genren Lentivirus och retrovirus (familj Retroviridae), som har ett RNA -genom som transkriberas till DNA genom omvänd transkriptas (TR).

I naturen är lentiviruset närvarande i primater, ungulates and Felines. I primater finns till exempel två fylogenetiskt relaterade linjer: Apesficiency Immunodeficiency Viruses (SIV) och människors immunbristvirus (HIV). Båda är de medel som orsakar förvärvat immunbristsyndrom (AIDS).

Källa: PhD DRE på English Wikipedia [CC BY-SA 3.0 (https: // CreativeCommons.Org/licenser/BY-SA/3.0)]

Lentivektor, erhållen från Lentivirus, har använts i stor utsträckning för grundläggande forskning inom biologi, funktionell genomik och genterapi.

[TOC]

Stadier av retrovirus livscykel

Livscykeln för allt retrovirus börjar med föreningen mellan organismen till en specifik receptor på cellens yta, följt av internaliseringen av viruset genom endocytos.

Cykeln fortsätter med eliminering av virusskyddet och bildningen av ett viral nukleoprotein (VNC) -komplex, som består av viral genom associerat med virala och cellulära proteiner. Sammansättningen av de komplexa förändringarna över tid och är relaterad till omvandling, genom TR, av Invader -genomet i en dubbel DNA -propeller.

Integrationen av virusgenomet till det för cellen beror på den virala genomkapaciteten för att penetrera värdkärnan. Omorganisationen av VNC har en viktig import i importen till kärnan, även om viktiga cellproteiner, såsom transportin-SR2/TNPO3, importin-alfa3 och importin7 också påverkar kärnan.

Kan tjäna dig: egenskaper hos levande varelser

Virala proteiner, såsom integrerade och transkriptionsfaktorer i värdcellen, såsom LEDCF, är nyckeln till integration av viral genom.

Detta använder värdcellens maskiner för att transkribera och översätta virala proteiner och för att montera virioner, frigör dem i extracellulärt utrymme.

Från lentivirus till lentivektor

Retrovirus -genomet har tre öppna avläsningsramar (MLA) för olika virala element. Till exempel kapsidia och matris (gen gag), enzymer (gen Pol) och wrap (gen skicka).

Konstruktionen av en viral vektor består av eliminering av vissa vilda virusgener, såsom de som är relaterade till virulens. På detta sätt kan en viral vektor infektera eukaryota celler, retro-transbribe, integreras i värdet av värd eukaryotcellen och uttrycka transgenen (insatt terapeutisk gen) utan att orsaka sjukdom.

En metod för konstruktion av lentivektor är övergångstransfektion. Det är baserat på användningen av virala minigenom (kallas konstruktioner) som endast transporterar intressanta gener. Övergångstransfektion består av oberoende konstruktion av konstruktioner.

Vissa retrovektorer har bara huvudelement för montering av virala partiklar, kallade icke -funktionella retrovektorer. De används för att transfektera förpackningsceller.

Vektorer med en transgenuttryckskassett kan infektera, transformera celler (transduktion) och uttrycka transgen.

Användningen av separata konstruktioner syftar till att undvika rekombinationshändelser som kan återställa den vilda fenotypen.

Lentivteknik

Lentivektortekniken har en stor användning i grundläggande biologi och translationella studier för överuttryck av transgener stabila, upplagan av gener regisserad efter plats, tystnad av ihållande gener, modifiering av stamceller, generering av transgena djur och pluripotenta cellinduktion.

Kan tjäna dig: vad är ortogenes?

Lentivektorer utgör lätt att manipulera och producera system. De är integrerade irreversibla och säkert värdgenomet. Infektera celler som är eller inte i division.

De visar tropism mot vissa tyger och underlättar terapi. De uttrycker inte virala proteiner, så de har låg immunogenicitet. De kan skicka komplexa genetiska element.

I grundläggande forskning har HIV -baserade lentivektorer använts som interferens RNA -sändningssystem (RNAi) för att eliminera funktionen hos en specifik gen, vilket gör det möjligt att studera interaktion med olika andra.

Lentivektor erhållen från HIV

I början av 90-talet byggdes de första lentivektorerna från HVI-1, som är nära besläktad med SIV av schimpans. HVI-1 ansvarar för aids över hela världen.

Den första generationen av lentivektor har en betydande del av HIV -genomet. Inkluderar gener Tjej och Pol, och flera ytterligare virala proteiner. Denna generation skapades med två konstruktioner. En av dem, som uttrycker fartyg, levererar förpackningsfunktioner. En annan uttrycker all MLA, med undantag för frakt.

Överföringsvektorn består av en expressionskassett markerad av två typer av långa repetitioner (LTR) och gener som är nödvändiga för förpackning och omvänd transkription.

Den andra generationen av förpackningsvektorer saknar de flesta tillbehörsgener och behåller Tat och Rev. Dessa gener togs bort i den tredje generationen och tillhandahölls av en fjärde konstruktion.

Tredje generationens överföringsvektorer består av två förpackningskonstruktioner. Man kodar Tjej och Pol. En annan kod Varv. En tredje konstruktion kodar kuvertet, som härstammar från VSV-G. Den som kodar för intressegenen innehåller LTT LTT -inaktiverade sekvenser för att undvika rekombination.

Kan tjäna dig: vad är binomial nomenklatur?

I det sista fallet ökar transkriptionsregleringselement prestandan för överföringsgener.

Lentivektor erhållen från andra virus

HIV-2-viruset är nära besläktat med Magabey Gris SIV (SIV_EDER) och ansvarar för AIDS i Västafrika. Från detta virus har första och andra generationens vektorer erhållits.

Liknar HVI-1, från SIV_EDER, av EIAV (infektiös anemivirus), av IVF (kattimmunbristvirus) och BIV (bovint immunbristvirus (BIV) av tre generationer har byggts. EIAV -baserade vektorer har utvecklats för klinisk användning.

Från Caprine Arthritis-IDephalitis Virus (CAEV) har första och tredje generationens vektorer byggts. Medan från IVR av African Green Monkey har första generationens vektorer byggts.

Referenser

1. Da silva, f. H., Dalberto, T. P., Beyer nardi, n. 2006. Beyond Retrovirusinfektion: HIV möter genterapi, genetik och molekylärbiologi, 29, 367-379.
2. Durand, s., Cimarelli, a. 2011. Insidan av lentiviral vektor. Virus, 3: 132-159.
3. Márai, J., Chuah, m. K. L., Van den drissche, t. 2010. Nya framsteg inom lentiviral vektorutveckling och applikationer. Molekylär terapi, 18: 477-490.
4. Milone, m.C., O'Doherty, u. 2018. Klinisk användning av lentiviral vektor. Leukemia, 32, 1529-1541.
5. Sakuma, t., Barry, m.TILL., Ikeda och. 2012. Lentivirala vektorer: Grundläggande till translationella. Biochemical Journal, 443, 603-618.