Histochemistry Foundation, bearbetning, färgning

De Histokemi Det är ett mycket användbart verktyg i studien av morfologin hos olika biologiska vävnader (grönsaker och djur) på grund av dess princip om reaktion av vävnadskomponenter såsom kolhydrater, lipider och proteiner, bland andra med färgämnen färgning.

Detta värdefulla verktyg tillåter inte bara att identifiera sammansättningen och strukturen för vävnader och celler, utan också de olika reaktionerna som förekommer i dessa. På samma sätt möjlig vävnadsskada, orsakad av närvaron av mikroorganismer eller andra patologier.

Histokemisk färgning. Nilvirus, Gram -positiva och Gram -negativa bakterier (Gram), Histoplasma Capsulatum (Grocott), Mycobacterium tuberculosis (Ziehl Neelsen). Källa: Pixinio.com/wikipedia.org/nefron [CC BY-SA 3.0 (https: // CreativeCommons.Org/licenser/BY-SA/3.0)]/cdc/dr. George P. KUBICA [Public Domain]

Histokemi, sedan tidigare århundraden har gett viktiga bidrag, till exempel demonstrationen av förekomsten av blodcellbarriären av Paul Ehrlich. Detta var möjligt tack vare det faktum att hjärnan hos experimentdjuret som användes av Ehrlich inte färgade med anilin, vilket är ett grundläggande färgämne.

Detta ledde till användning av olika färgämnen såsom metylen och indofenolblått för att färga de olika typerna av celler. Denna upptäckt gav upphov till klassificeringen av celler i acidofila, basofila och neutrofiler, enligt deras specifika färgning.

Nya studier har använt denna teknik för att visa närvaron av olika föreningar, inklusive fenoler, såväl som kolhydrater och icke -strukturella lipider i arten av arten Litsea glaucescens, mest känd som Laurel. Att vara dessa, både i lakan och i träet.

Likaså Colares et al, 2016, identifierade den medicinska intresseanläggningen Tarenya Hassleriana, genom histokemiska tekniker. I denna art bevisades närvaron av stärkelse, mirosina, såväl som fenoliska och lipofila föreningar.

[TOC]

Grund

Histokemi är baserad på färgning av cellstrukturer eller molekyler som finns i vävnaderna, tack vare deras affinitet med specifika färgämnen. Färgreaktionen för dessa strukturer eller molekyler i sitt ursprungliga format visualiseras därefter i det optiska mikroskopet eller elektroniskt mikroskop.

Specificiteten för färgning beror på närvaron av jon som accepterar grupper som finns i cellerna eller vävnadsmolekylerna.

Slutligen är målet med histokemiska reaktioner att kunna bevisa genom färgning. Från de största biologiska strukturerna till de minsta vävnaderna och cellerna. Detta kan uppnås tack vare det faktum att färgämnen reagerar kemiskt med molekylerna i vävnaderna, cellerna eller organellerna.

Det kan tjäna dig: vad är gastration?

Åtal

Den histokemiska reaktionen kan leda till steg innan tekniken förverkligas, såsom fixering, inkludering och skärning av vävnaden. Därför bör det beaktas att du i dessa steg kan skada strukturen som du vill identifiera, kasta falska negativa resultat, även om det är närvarande.

Trots detta är den tidigare fixeringen av vävnaden som utförs ordentligt viktigt, eftersom hon förhindrar autolys eller cellförstörelse. För detta.

Införandet av vävnaden görs så att den upprätthåller sin fasthet vid skärning och därmed förhindrar att den deformeras. Slutligen görs snittet med en mikrotom för att studera prover genom optisk mikroskopi.

Innan du fortsätter med att utföra histokemisk färgning rekommenderas dessutom att de integrerar externa eller interna positiva kontroller i varje tester. Liksom användningen av specifika färgämnen för strukturer för att studera.

Histokemisk färgning

Från uppkomsten av histokemiska tekniker till nutid har ett brett utbud av färgämnen använts, bland vilka den vanligaste användningen som: Schiff (PAS), Grocott, Ziehl-Neelsen och Gram.

På samma sätt har andra färgämnen använts mindre ofta, såsom kinesiskt bläck, orcein eller Massons trikromfärgning, bland andra.

Schiff's Peródic Acid (PAS)

Med denna färg kan du se molekyler med högt kolhydratinnehåll, såsom: glykogen och mucin. Det är emellertid också användbart för identifiering av mikroorganismer som svampar och parasiter. Förutom vissa strukturer (basmembran) i huden och i andra vävnader.

Grunden för denna färgning är att Coloring Oxida som kolobligationerna finns mellan två närliggande hydroxilsgrupper. Detta producerar frisläppandet av aldehydgruppen, och detta upptäcks av Schiff -reagensen och kastar en lila färg.

Schiff -reagenset består av grundläggande fuchsin, natriummetabisulfit och saltsyra, varvid dessa komponenter är ansvariga för lila färgning, när aldehydgrupperna är närvarande. Annars genereras en färglös syra.

Kan tjäna dig: isomeras: vad är, funktioner, nomenklatur, typer

Färgintensitet beror på mängden hydroxilligrupper som finns i monosackariderna. Till exempel i svampar, basmembran, mucinas och glykogen kan färgen gå från rött till lila, medan kärnorna är färgade blå.

Grodd

Det är en av färgningen som presenterar den största känsligheten i identifieringen av svampar i vävnader som ingår i paraffin. Detta möjliggör identifiering av de olika svampstrukturerna: hyfer, sporer, endosporer, bland andra. Därför betraktas det som en rutinfärgning för mykosdiagnos.

Speciellt används det vid diagnosen pulmonell mykos såsom pneumocystos och aspergilos orsakad av vissa genressvampar Pneumocystis och Aspergillus, respektive.

Denna lösning innehåller silver- och kromsyra -nitrat, den senare är en fixativ och färgämne. Grunden är att denna syra producerar oxidationen av hydroxilerna till aldehydos, av de mukopol som finns i de plockade strukturerna, till exempel i cellväggen i svamparna.

Slutligen oxideras silver som finns i lösningen av aldehyderna, vilket orsakar en svart färg, som kallas argentafin reaktion. Du kan också använda kontrastfärgämnen som ljusgrön och därmed svampstrukturer i svart med en ljusgrön bakgrund kommer att observeras.

Ziehl-neelsen

Denna färgning är baserad på närvaron av syra-alkoholresistens, delvis eller totalt, i vissa mikroorganismer som genrer Nokardi, Legionella och Mycobacterium.

Användningen av denna färgning rekommenderas, eftersom cellväggen i de tidigare citerade mikroorganismerna innehåller komplexa lipider som hindrar penetrationen av färgning. Särskilt i luftvägsprover.

Starka färgämnen som fenicada fuchsin (grundfärg) används i den och värme appliceras så att mikroorganismen kan behålla färgämnet och inte missfärgas med syror och alkoholer. Slutligen appliceras en metylenblå lösning för att färga de strukturer som har missfärgats.

Närvaron av syra-alkoholmotstånd observeras i röda strukturer, medan strukturer som inte motstår missfärgning är färgade blå.

Gram och kinesiskt bläck

Gram är en mycket användbar färg i diagnosen av bakterie- och svampinfektioner, bland andra. Denna färgning gör det möjligt att skilja mellan Gram -positiva mikroorganismer av det negativa gram, vilket tydligt bevisar de skillnader som finns i sammansättningen av cellväggen.

Kan tjäna dig: Saponificable Lipids: Egenskaper, struktur, funktioner, exempel

Medan kinesiskt bläck är en färgning som används för att kontrastera strukturerna som innehåller polysackarider (kapsel). Detta beror på att en ring bildas i miljön som är möjlig i Cryptococcus neoformans.

Orcein

Med denna färgning färgas elastiska fibrer och kromosomer i olika celler, vilket möjliggör utvärdering av mognadsprocessen för den senare. Av denna anledning har det varit mycket användbart i cytogenetiska studier.

Detta är baserat på insamlingen av färgämnet genom den negativa belastningen av molekyler såsom DNA, närvarande i centrum för det stora variationen av celler. Så dessa är färgade blå till mörk violetta.

Massons trikromiska

Denna färgning används vid identifiering av vissa mikroorganismer eller material som innehåller mellatiska pigment. Detta är fallet med mykos, orsakad av dematiakvampar, ugohifomikos och i svartkorn Eumiketom.

Slutliga överväganden

Under de senaste åren har det varit många framsteg i skapandet av nya diagnostiska tekniker, där histokemi är involverad men kopplad till andra stiftelser eller principer. Dessa tekniker strävar efter ett annat syfte, liksom fallet med immunohistokemi eller enzymohistokemi.

Referenser

1. Acuña U, Elguero J. Histokemi. En. Kem. 2012; 108 (2): 114-118. Finns på: är.Iqm.CSIC.är
2. Mestanza r. Frekvens av histokemisk färgning av PAS, Grocott och Ziehl-Neelsen som används för identifiering av mikroorganismer, utförda i den patologiska anatomitjänsten i Eugenio Espejo Specialties Hospital 2015. [Kandidatuppsats]. Central University of Ecuador, Quito; 2016. Finns på: Dspace.Uce.Edu
3. Tapia-Torres N, de la Paz-Pérez-Olvera C, Román-Guerrero A, Quintanar-Isaías A, García-Márquez E, Cruz-Sosa F. Histokemi, totalt fenolinnehåll och blad- och träantioxidantaktivitet Litsea glaucescens Kunth (Laureaceae). Trä och skogar. 2014; 20 (3): 125-137. Finns på: redalyc.org
4. Colares, MN, Martínez-Alonso, S, ARABARRI, AM. Anatomi och histokemi av Tarenaya Hassleriana (Cleomaceae), ett slags medicinskt intresse. Latinamerikanska och karibiska bulletin av medicinska och aromatiska växter 2016; 15 (3): 182-191. Finns på: redalyc.org
5. Bonifaz a. Grundläggande medicinsk mykologi. Fjärde upplagan. Mexiko: McGraw-Hill Inter-American Editors, S.TILL. av C.V. 2012.
6. Silva Diego Filipe Bezerra, Santos Hellen Bandeira de Pontes, León Jorge Esquiche, Gomes Dalian. Klinikpatologisk och immunohistokemisk analys av spindelcellen skivepitelcancer i tungan: ett sällsynt fall. Einstein (São Paulo) 2019; 17 (1): ERC4610. Tillgänglig från: Scielo.Bras