Agar Xld Foundation, förberedelser och användningar

han Xld -agar O Acho Xilosa Lysine Desoxicate är en selektiv och differentiell solid kultur för enteropatogen isolering. Taylor designade XL -agarformeln (xylos, lysin) för att förbättra isoleringen av Shigella -släktet.

Han noterade att denna genre hämmades i de flesta medier avsedda för enteropatogenisolering. Därefter tillsattes han natriumdexicolat, natriumtiosulfat och järnhaltig citrat för att öka sin selektivitet. Denna formel har visat sig vara användbar för både Shigella och Salmonella -isolering.

Skillnader från kolonierna av Shigella, Salmonella och Coliforms i Agar XLD. TILL. Shigella SP, B. Salmonella SP, C. Koliformer. Källor: a. Av: CDC/ Amanda Moore, MT; Todd Parker, PhD; Audra Marsh, med tillstånd: Public Health Image Library B. https: // ladda upp.Wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/salmonella_species_growing_on_xld_agar _-_ show_h2s_produktion _ -_ detalj.Jpg c. Av: cdc/dr. J. J. Bonde, artighet: Public Health Image Library

XLD -agaren består av jästextrakt, natrium, xylos, lysin, laktos, sackaros, natriumtiosulfat, järnammoniumcitrat, natriumklorid, röd fenol och agar och agar. I de flesta bakteriologiska laboratorier används Agar XLD och SS Agar Duo för att studera fekala prover på jakt efter Shigella och Salmonella.

Andra laboratorier föredrar kombinationen av Chromagar Salmonella och Agar XLD, bland andra tillgängliga alternativ. Dessa duos kan förberedas i dubbla Petrie -plattor. På ena sidan placerar de Agar XLD och på motsatt sida valet det andra mediet.

[TOC]

Grund

-Näringskraft

XLD -agaren har jästextraktet, som fungerar som en källa till näringsämnen till mikroorganismerna som utvecklas i denna agar. Dessutom ger närvaron av kolhydrater (xylos, sackaros och laktos) energi till bakterierna som kan jäsa dem.

-Medium selektivitet

Som ett hämmande ämne presenterar den natriumlayout; Detta förhindrar tillväxten av Gram -positiva bakterier, vilket ger den medium selektiva karaktären.

-Differentiell kraft

Typiska Shigella -kolonier

Som redan nämnts innehåller XLD -agaren xylos; Detta kolhydrat fermenteras av alla bakterier som växer i detta medium förutom släktet Shigella.

Kan tjäna dig: Hardy-Weinberg Law

Detta är en av de egenskaper som dess differentiella karaktär erbjuder, eftersom Shigellas kolonier skiljer resten genom att utveckla röda kolonier, medan de andra bakterierna producerar gula kolonier.

Typiska kolonier av Salmonella

Kön Salmonella jäsar också xylosen och genererar initialt gula kolonier. Efter uttömning av xyloskolhydratet, attackerar dock lysin med dess enzym lysin decarboxylas. Lysindekarboxylering genererar alkalier som gör färgen på kolonin och det ursprungliga röda till det ursprungliga röda.

Detta beteende utförs endast av Salmonella, eftersom coliformarna som decarboxyle. Detta beror på att koliformer också jäsar laktos och sackaros närvarande; Därför är syraproduktionen mycket hög, vilket lämnar den gula kolonin i dessa bakterier.

Det bör noteras att könen Salmonella inte jäsar sackarosen, inte heller laktos.

H₂S

XLD -agaren tillåter också att upptäcka arter av Salmonella -producenter av H₂S; För att göra detta har den sulfidkällan representerad av natriumtiosulfat och en reaktionsutvecklare som är den järnhaltiga ammoniumcitratet.

Den senare reagerar med H₂S (färglös gas) och bildar en synlig svart fällning olöslig järnsulfat. I detta avseende kommer egenskaperna hos Salmonellas kolonier att vara röda med ett svart centrum.

Det bör noteras att för reaktionen av h₂S, ett alkaliskt pH behövs. Det är därför andra enterobakterier som bildar H₂De kan inte göra det eller göra det dåligt i den här miljön, eftersom den höga surhet som de producerar när man jäsar kolhydraterna förekommer eller hindrar reaktionen.

-Natriumklorid, agar och fenolröd

Slutligen upprätthåller natriumklorid den osmotiska balansen; Agaren är det stelnande medlet och fenolens röda upptäcker förändringarna av pH, vilket vänder koloniernas färg och mediet.

Förberedelse

Väg 55 gr XLD dehydratiserad och upplöses i 1 liter vatten. Värm och skaka blandningen tills den når kokpunkten. Överhettas inte, eftersom värmen skadar mediet och skapar en fällning som förändrar morfologin för de typiska kolonierna.

Kan tjäna dig: Proteoglycans

Detta medium ska inte autoklaveras. När du löser måste du passera till ett badrum från 50 ° C. När kylning ska serveras direkt på Petri sterila plattor. De kan dämpas i enkla plattor eller dubbla plattor. De får stelna och hålla sig i kylen tills det används.

Temperament innan du använder. Som är ett icke -steriliserat medium rekommenderas det att förbereda det nära användningsdatumet.

Det sista pH för mediet måste vara på 7,4 ± 0,2. Färgen på den beredda är orange röd, genomskinlig, utan fällning.

Om det finns en lysin xylosagar (XL), natrium, natriumtiosulfat och amoniskt järncitrat kan tillsättas. På detta sätt erhålls XLD -agarformeln.

Ansökningar

XLD -agaren används för återhämtning av enteropatogener, främst av Shigella -släktet och sekundärt av könen Salmonella. Det är användbart för utvärdering av avföring, vatten och matprover.

Typer av prover

Pall

Avföringen kan sådd direkt i XLD -agaren, vilket gör en bra fördelning av materialet för att få isolerade kolonier.

För att förbättra återhämtningen av Salmonella, XLD överenskoms från anrikningsmedel för Salmonella kan sås sås.

Mat

När det gäller mat kan anrikningsbuljonger användas för Salmonella och Shigella. För Salmonella kan du använda selenito -buljongcystin, ljusgrön tetrationell buljong, bland andra.

När det gäller Shigella kan den berikas med Shigella-buljongen med 0,5 u/ml novobiocina, inkuberad vid 42 ° ± 1 ° C under 16-20 timmar.

Vatten

I vattenanalys rekommenderas bland annat membranfiltreringstekniken och användningen av XLD -agar.

Sådd och identifieringsförhållanden

Det sådd mediet inkuberas vid aerobios vid 35 ° C under 24 till 48 timmar.

Det kan tjäna dig: Flora och fauna i Indien

De typiska kolonierna för varje genre observeras, de misstänkta kolonierna bör utföras biokemiska tester för identifiering.

QA

För att utvärdera kontrollen av medelkvalitet kan följande bakteriestammar användas: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella Abony DSM 4224, Shigella flexneri ATCC 12022, Shigella Sonnei ATCC 25931, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus Mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 33495.

Salmonella -släktet kännetecknas av att presentera i denna mediumröda kolonier med svarta centrum eller helt svarta kolonier. Medan i Shigella -släktet måste kolonierna vara röda, det vill säga mediet.

Vid Escherichia coli Det förväntas bli helt eller delvis hämmas; Om kolonierna växer är gula. För Proteus Mirabilis Knappt tillväxt förväntas med rosa kolonier med eller utan svart centrum. Slutligen kommer släktet Klebsiella att växa som gula kolonier.

Slutliga överväganden

XLD -agaren används mycket i Bacteriology Laboratories för sin höga effektivitet för återhämtning av Shigella och har också en god återhämtning av Salmonella -släktet.

Rall och kollaboratörer (2005) i sitt arbete med titeln "Utvärdering av tre anrikningsbuljonger och fem solida medier för upptäckt av Salmonella i fjäderfä" visade att av de tre klassiska medierna som bevisats (Bright Green Agar, SS Agar och Agar XLD), Agar XLD erhållit den bästa återhämtningsgraden.

Återställningsprocenten var följande: 13.8% för ljusgrön agar, 27.6% för SS och 34.5% för XLD. Det överträffades bara av kromogen mediaagar Rambach med 48% återhämtning och kromagar med 79.3%.

Referenser

1. Matöverförda sjukdomar. Shigellos. Finns på: Anmat.Gov.ar
2. “Agar XLD." Wikipedia, fri encyklopedi. 9 feb 2019, 11:46 UTC. 10 april 2019, 19:25 Wikipedia.org
3. BBL -laboratorier. Chromagar Salmonella / BD XLD AGAR (BIPACCA).2013 tillgänglig på: BD.com
4. Labb. Neogen. Xld -agar. Finns på: FoodSafety.Neogen
5. Francisco Soria Melguizo Laboratory. Xld -agar. Finns på: http: // f-soria.Det är/informerar
6. Rall L, Rall R, Aragon C, Silva M. Utvärdering av tre Enrichmment Bruths och fem pläteringsmedier för Salmonella -upptäckt i fjäderfä. Braz. J. Mikrobiol.  2005; 36 (2): 147-150. Tillgänglig från: Scielo.Bras
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 ed. Pan -amerikanska redaktionella.TILL. Argentina.